油橄欖 Oleaeuropaea L.為木犀科木犀欖屬常綠喬木，是世界著名的木本油料樹種，有四千多年的栽培歷史。油橄欖主要分布在地中海國(guó)家，希臘、意大利、突尼斯、西班牙為集中產(chǎn)地。自古以來，由橄欖果制作的產(chǎn)品就被作為食物和傳統(tǒng)藥物使用。研究表明橄欖具有增強(qiáng)心臟健康[1-3]、抗癌、抗菌、抗炎等多種生物和藥理活性[4]?，F(xiàn)代生物技術(shù)分析表明，油橄欖中活性物質(zhì)主要有橄欖多酚、黃酮類、裂環(huán)烯醚萜類(包括橄欖苦苷)、雙黃酮等，并且其抗氧化生物活性物含量高于油橄欖果和莖[5-8]。

橄欖果提取物

　　本文對(duì)橄欖多酚類物質(zhì)的抗氧化研究作一綜述，表明橄欖多酚的自由基清除能力也可能對(duì)皮膚健康產(chǎn)生直接影響。

　　1、橄欖果中的主要化學(xué)組成及抗氧化研究綜述

　　橄欖果實(shí)含油率高達(dá)30%，栽培油橄欖主要是利用果實(shí)中的油脂加工橄欖油。據(jù)生化分析，橄欖油由皂化物部分和不皂化物部分組成。皂化物部分包括游離脂肪酸和三甘油酯，三甘油酯占 98.5 % 左右;不皂化物占 1.5 %左右，包括游離醇、三萜烯、色素(葉綠素和類胡蘿卜素)、生育酚、多酚、甾醇、角鱉烯及揮發(fā)性成分等。油橄欖葉中橄欖苦甙和黃酮等多酚類化合物成分復(fù)雜，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)油橄欖的化學(xué)成分做了深人的研究，已經(jīng)分離得到 100 多個(gè)化合物[9-11]。油橄欖抗氧化生物活性成分主要是橄欖苦甙(oleuropein)、羥基酪 醇(hydroxytyrosol)、黃酮類(flavonoids)、木酚素類(lignan) 等，而具有羥基酪醇母體結(jié)構(gòu)的小分子二酚類化合物最具有抗氧化活性作用，其中羥基酪醇和橄欖苦苷是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

　　孫瑾等[12]對(duì)提取純化后得到的橄欖多酚類物質(zhì)，通過測(cè)定其還原力、對(duì)自由基的清除能力，及對(duì)油脂過氧化的抑制作用，研究了其體外抗氧化活性，并與VC 和 BHT 進(jìn)行了對(duì)比結(jié)果表明，橄欖多酚對(duì)羥基自由基、亞硝酸鹽有較強(qiáng)的清除作用，在一定范圍內(nèi)，清除效果隨質(zhì)量濃度的升高而加強(qiáng)。另外，在相同濃度下，橄欖多酚對(duì)超氧陰離子自由基的清除率低于VC和BHT。另有研究對(duì)橄欖酚類提取物進(jìn)行不同的抗氧化體系檢測(cè)，結(jié)果表明，橄欖酚類提取物具有比 BHA(與食品抗氧化劑丁基羥基茴香醚)和 VC 更強(qiáng)的自由基清除能力及鐵離子還原力，具有較好的體外抗氧化能力[13]。很多實(shí)驗(yàn)都證明橄欖多酚提取物具有較強(qiáng)的自由基清除能力及較高的抗氧化活性;而且在各體系中，橄欖多酚提取物的抗氧化活性與其濃度之間均有良好的量效關(guān)系[14]。

　　橄欖多酚的抗氧化性是一種綜合效應(yīng)，抗氧化性主要來源于多酚分子中大量的羥基酪醇[15-18]。羥基酪醇(hydroxytyrosol)，又名 3，4-二羥基苯乙醇，是一種天然抗氧化劑，廣泛存在于橄欖的枝葉及果實(shí)中，特別是地中海地區(qū)的橄欖樹中含量較高，是橄欖油的有效成分。大量的研究表明羥基酪醇具有很強(qiáng)的抗氧化作用[19-23]，羥基酪醇作為氫供體，對(duì)多種活性氧具有清除作用，可將單線態(tài)氧 1O2 還原成活性較低的三線態(tài)氧 3O2，減少氧自由基產(chǎn)生的可能性，同時(shí)也是各種自由基有效的清除劑，生成活性較低的多酚自由基，打斷自由基氧化的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)[24];并可阻止多不飽和脂肪酸的自氧化，防止 DNA 受氧化損害[25]。

富恒生物橄欖多酚

　　機(jī)體不正常的代謝產(chǎn)生大量的氧自由基，當(dāng)氧自由基的數(shù)量超過體內(nèi)抗氧化防御能力，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷，此時(shí)機(jī)體則處于氧化應(yīng)激態(tài)。氧化應(yīng)激是活性氧(ROS)的產(chǎn)生和細(xì)胞抗氧化能力的失衡引起的[26]，它將影響細(xì)胞大多數(shù)成分，如脂質(zhì)，蛋白質(zhì)和 DNA。氧化應(yīng)激與疾病有顯著的直接關(guān)系，其可導(dǎo)致亞健康甚至疾病的發(fā)生。

　　流行病學(xué)研究顯示，大量攝入食物中的抗氧化劑可有效對(duì)抗氧化應(yīng)激。藥理學(xué)數(shù)據(jù)和臨床試驗(yàn)證明，橄欖果提取物可有效提高抗氧化防御能力、對(duì)抗氧化應(yīng)激[27-28]。如通過測(cè)量大鼠體內(nèi)氧化標(biāo)記物 8-異前列烷(8-異前列腺素 F2α )的排泄量，證明橄欖果提取物在大鼠體內(nèi)具有顯著的抗氧化效果[29]。此外，另有臨床試驗(yàn)對(duì) 19 名健康受試者連續(xù) 4 周每天服用 400 mg 的橄欖果提取物，在研究開始前和為期四周的治療結(jié)束后，分別測(cè)量尿樣中的氧化應(yīng)激標(biāo)記物 8-異前列烷的尿排泄量。試驗(yàn)表明橄欖果提取物顯著降低了氧化標(biāo)記物的形成(47 %，P<0.05 平均數(shù)據(jù))，顯著改善健康受試者的氧化狀態(tài)[30]。

　　2、橄欖果提取物對(duì)皮膚健康研究進(jìn)展

　　皮膚的衰老與機(jī)體的衰老是同時(shí)進(jìn)行的，皮膚老化是機(jī)體衰老的一部分。因?yàn)槠つw位于機(jī)體的最外層，更多地受到外源性因素的影響，因此皮膚的老化是內(nèi)源性因素和外源性因素共同作用的結(jié)果[31]。皮膚外源性的老化與紫外線(UV)的照射、風(fēng)吹、吸煙、飲酒、與刺激物接觸有關(guān)。而 UV 的長(zhǎng)期照射是環(huán)境中促進(jìn)皮膚老化的最主要因素，故外源性老化一般是指光老化[32]。

　　光老化在臨床上及組織學(xué)上均有特點(diǎn)。臨床表現(xiàn)主要是：暴露部位皮膚松弛、粗深皺紋、結(jié)節(jié)、皮革樣外觀，色素斑增多，毛細(xì)血管擴(kuò)張，原有幾何圖形外觀明細(xì)改變或消失，膚色常呈灰黃色，可發(fā)生各種良性、癌前期或惡性腫瘤。光老化皮膚在組織學(xué)主要表現(xiàn)為：真皮層炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，彈性纖維增粗、排列紊亂或聚集成團(tuán)，真皮層上層膠原退行性變明細(xì)、最后成為無定形物質(zhì);皮膚毛細(xì)血管擴(kuò)張并扭曲，最后變得極為稀疏，黑素細(xì)胞灶性增生等[32]。

　　光老化皮膚中的許多改變，如粗細(xì)皺紋、皮膚粗糙及色素沉著等可以通過藥物改善和逆轉(zhuǎn)，治療和預(yù)防皮膚的光老化是可能的。在皮膚皺紋與飲食結(jié)構(gòu)關(guān)系的調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，日常大量食用橄欖制品的人群皮膚皺紋相對(duì)較少，進(jìn)一步推測(cè)橄欖多酚的自由基清除能力也可能對(duì)皮膚健康產(chǎn)生直接的影響，包括預(yù)防與皺紋形成、皮膚變薄以及缺水有關(guān)的氧化效應(yīng)[33-34]。并陸續(xù)有研究不斷證明的此推論的正確性。

　　近年來國(guó)內(nèi)外對(duì)橄欖果提取物對(duì)皮膚光老化的防治作用進(jìn)行了頗有成效的研究，現(xiàn)綜述如下。

　　2.1 促進(jìn)曬后皮膚的健康

　　在一項(xiàng)安慰劑對(duì)照試驗(yàn)中，連續(xù) 4 周給 13 位男性研究對(duì)象口服橄欖果提取物，劑量為 160 mg/天。然后在其背部區(qū)域連續(xù)使用 0.054 J/cm2 到 0.135 J/cm2 劑量的紫外線(UVA+UVB 0.45 Mw/cm2 )照射。在口服橄欖果提取物前后，分別測(cè)量最低紅斑劑量(MED)。結(jié)果顯示橄欖果提取物使 MED 平均增加 16.45 %(P<0.01)，表明橄欖果提取物有助于促進(jìn)曬后皮膚的健康[30]。

　　另外，研究通過模擬活體內(nèi)的情況，如皮膚受紫外線照射后導(dǎo)致超氧陰離子在組織和細(xì)胞內(nèi)生成，顯示橄欖果提取物中多酚對(duì)活性氧如超氧陰離子 O2-具有清除能力[34-35]。生物體內(nèi)氧的單電子還原，生物分子的酶促氧化和自氧化都可產(chǎn)生各種氧自由基。這些自由基的強(qiáng)反應(yīng)性是導(dǎo)致細(xì)胞氧化損傷和衰老的主要原因。通過對(duì)橄欖中多酚類物質(zhì)體外抗氧化活性研究顯示橄欖多酚類物質(zhì)具有良好的抗氧化性能，特別是在清除羥自由基方面，表現(xiàn)出了明顯的優(yōu)勢(shì)[12]。

　　2.2 修復(fù)表皮滲透屏障，防止形成紫外線導(dǎo)致的光老化皺紋

　　紫外輻射可破壞皮膚表皮滲透屏障。有研究通過每天給成年無毛小鼠喂食 6.25 mg/kg~125 mg/kg 劑量的橄欖果提取物中的毛蕊花苷，持續(xù) 11 d。分別于紫外線照射后的當(dāng)天、第 3 天、第 4 天測(cè)量 TEWL(經(jīng)表皮失水率)，發(fā)現(xiàn) TEWL 有顯著性下降，這表明毛蕊花苷對(duì)表皮滲透屏障發(fā)揮了保護(hù)作用[29]。太陽(yáng)光照會(huì)促進(jìn)光老化，并形成皺紋。有試驗(yàn)將成年無毛小鼠置于紫外線 UVA 和 UVB 下進(jìn)行照射，同時(shí)不斷增加紫外線的劑量，并給小鼠喂食橄欖果提取物。根據(jù)皺紋等級(jí)評(píng)分表來測(cè)量每只小鼠的皺紋形成情況，結(jié)果顯示服用橄欖果提取物后紫外線誘發(fā)的皺紋形成率降低的 38 %(P<0.001);同時(shí)，因?yàn)楸砥ず穸仁窃u(píng)價(jià)紫外線誘發(fā)的皮膚炎癥的有用參數(shù)，經(jīng)測(cè)量，表皮厚度降低了 28 %[29]。

　　2.3 抑制皮膚脂質(zhì)過氧化

　　皮膚干燥是富含脂質(zhì)的組織發(fā)生氧化應(yīng)激所致[36-37]。對(duì)于干燥的皮膚而言，脂質(zhì)過氧化物是主要的非自由基中間體。對(duì) 23 名健康男性受試者進(jìn)行了臨床評(píng)價(jià)，他們每天分別在兩頰上涂抹含有橄欖果提取物的制劑和安慰劑，一天 2 次，連續(xù) 3 個(gè)月。分別在研究開始前、第 8 周和第 12 周測(cè)量皮膚角質(zhì)層的水分、皮膚彈性以及皮膚紋理。與安慰劑組相比，含有橄欖果提取物的樣品對(duì)紋理分析中的粗糙度參數(shù)有顯著改善。同時(shí)，角質(zhì)層中的水分也呈現(xiàn)改善趨勢(shì)[38]。

　　2.4 葡萄糖苷酶的抑制作用

　　對(duì)于皮膚健康而言，健康的血糖代謝至關(guān)重要。高血糖使人體代謝功能紊亂，病人體內(nèi)葡萄糖不能利用，蛋白質(zhì)、脂肪消耗增多，組織、細(xì)胞正常必需營(yíng)養(yǎng)得不到供應(yīng)，引起免疫力下降，而且高血糖也是各種細(xì)菌和真菌的良好培養(yǎng)基，所以容易被細(xì)菌感染，引起皮膚真菌性感染，如如體癬、指甲癬、足癬等[39]。使用不同濃度的橄欖果糖提取物測(cè)試 α-葡萄糖苷酶的活性，結(jié)果顯示橄欖果提取物對(duì)這種酶有很好的抑制作用，可以通過維持健康的血糖代謝促進(jìn)皮膚健康[27]。

　　3、結(jié)語(yǔ)

　　綜上所述，橄欖果提取物的抗氧化和自由基清除能力已經(jīng)顯示了其在皮膚層面的有益作用，而且可以有效處理自由基介導(dǎo)的應(yīng)激問題，如皺紋形成、表皮屏障破壞等，使其在食品添加劑、化妝品、保健食品和醫(yī)藥工業(yè)方面具有廣闊的應(yīng)用前景。但橄欖果提取物中的化學(xué)成分，尤其是橄欖多酚、羥基酪醇的抗氧化及對(duì)抗皮膚光老化作用機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，當(dāng)前的研究多限于體外生物實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物試驗(yàn)，臨床研究較少，橄欖果提取物在皮膚健康方面的作用需要更多的理論、臨床數(shù)據(jù)支持。

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