低聚半乳糖對腸道益生菌作用機理的研究

【摘要】： 益生菌作為一種活性微生物,憑借其對人體腸道菌群平衡的調(diào)節(jié)作用,如建立厭氧微環(huán)境、分泌抑菌產(chǎn)物、合成對宿主機體有重要作用的營養(yǎng)物等,受到人們的廣泛關(guān)注和認可。低聚半乳糖是一種食療效果好、安全性高和認可度廣泛的功能性低聚糖,其優(yōu)越的生物活性,如有利于雙歧桿菌增值、低齲齒性、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝和預防便秘等,日益受到人們的關(guān)注。低聚半乳糖和益生菌對人體均有益處,但低聚半乳糖對益生菌的作用機理卻知之甚少。因此,本研究以植物乳桿菌和雙歧桿菌作為腸道益生菌代表,以低聚半乳糖、乳糖、半乳糖和葡萄糖為碳源,以大腸桿菌和金黃色葡萄球菌為致病菌代表,探究低聚半乳糖對腸道益生菌的作用機理,以及腸道益生菌對致病菌的抑制成分。獲得的結(jié)果如下：1.腸道益生菌利用低聚半乳糖通過運用高效液相色譜儀對發(fā)酵前后發(fā)酵液中碳源進行檢測,來確定腸道益生菌能否利用低聚半乳糖為碳源進行生長。高效液相色譜檢測結(jié)果表明,發(fā)酵前后發(fā)酵液中的碳源發(fā)生了改變,由種類較少的多糖分解成種類較多的單糖和二糖,因此腸道益生菌可以利用低聚半乳糖。2.低聚半乳糖對腸道益生菌生長狀況的影響通過對腸道益生菌生長曲線的測定,以及細胞形態(tài)和完整性的觀察,確定低聚半乳糖對腸道益生菌生長狀況的影響。結(jié)果表明,腸道益生菌利用低聚半乳糖后對細胞的完整性與利用葡萄糖無異,而生長狀態(tài)較葡萄糖好,因此低聚半乳糖有助于腸道益生菌的生長增殖。3.腸道益生菌抑菌成分的分析通過高效液相色譜儀、苯酚-硫酸法和牛津杯法的應用,以大腸桿菌和金黃色葡萄球菌為實驗致病菌,對腸道益生菌分泌的抑菌成分進行分析。高效液相色譜檢測結(jié)果表明,腸道益生菌分泌的抑菌成分中含有乳酸、乙酸和丁酸等短鏈脂肪酸；苯酚-硫酸法檢測結(jié)果表明,腸道益生菌分泌的抑菌成分中含有胞外多糖；牛津杯法檢測結(jié)果表明,腸道益生菌分泌的抑菌成分中含有H202和細菌素等抑菌蛋白。4.低聚半乳糖對腸道益生菌合成抑菌成分的影響通過對照實驗以及高效液相色譜儀、苯酚-硫酸法和牛津杯法的應用,以大腸桿菌和金黃色葡萄球菌為實驗致病菌,探究低聚半乳糖對腸道益生菌分泌的抑菌成分的影響。結(jié)果表明,低聚半乳糖可以使腸道益生菌產(chǎn)生更多的乳酸和短鏈脂肪酸、胞外多糖和抑菌蛋白。通過以上實驗結(jié)果,初步推斷低聚半乳糖對腸道益生菌的作用機理是：低聚半乳糖使腸道益生菌大量增殖,形成數(shù)量優(yōu)勢,然后促進分泌更多的短鏈脂肪酸,形成酸性環(huán)境,抑制致病菌的正常生長,產(chǎn)生更多的胞外多糖粘附致病菌,同時產(chǎn)生抑菌蛋白導致致病菌死亡。

【學位授予單位】：齊魯工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015

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