引用本文

王愛(ài)華, 任昕昕, 琚妍妍, 李娜, 宋歌, 董林沛, 黃健. 減肥食品中非法添加化學(xué)藥物現(xiàn)狀及檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J].刑事技術(shù), 2019,44(6):530-534
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Doi: 10.16467/j.1008-3650.2019.06.012
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《刑事技術(shù)》編輯部

1.公安部物證鑒定中心,北京市現(xiàn)場(chǎng)物證檢驗(yàn)工程技術(shù)研究中心,北京 100038

2.焦作市公安局刑偵支隊(duì),河南 焦作 454150

3.德州市公安局物證鑒定研究中心,山東 德州 253000

第一作者簡(jiǎn)介：王愛(ài)華,女,安徽阜陽(yáng)人,碩士,助理研究員,研究方向?yàn)榉ㄡt(yī)毒物分析及法醫(yī)病理學(xué)。E-mail: wangaihuatju@126.com

基金資助:

中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目（NO.2016JB015）

1.Institute of Forensic Science, Ministry of Public Security & Beijing Engineering Research Center of Crime Scene Evidence Examination, Beijing 100038, China

2.Criminal Police Detachment, Jiaozuo Public Security Bureau, Jiaozuo 454150, Henan, China

3.Center for Evidential Materials’ Authentication and Research, Dezhou Public Security Bureau, Dezhou 253000, Shandong, China

近年來(lái), 隨著人們生活水平的提高和生活節(jié)奏的加快, 日常飲食中大量高脂高油食物的攝入和運(yùn)動(dòng)量的減少, 快節(jié)奏生活和工作壓力下的不健康的生活方式, 導(dǎo)致肥胖成為亞健康的第一因素, 由此也促進(jìn)了減肥類保健食品的迅猛發(fā)展?！吨腥A人民共和國(guó)食品安全法》第三十八條規(guī)定：“ 生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)的食品中不得添加藥品?！?第七十四條規(guī)定：“ 國(guó)家對(duì)保健食品、特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品和嬰幼兒配方食品等特殊食品實(shí)行嚴(yán)格監(jiān)督管理?！?因此, 作為特殊食品的保健食品, 其生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)應(yīng)當(dāng)更加嚴(yán)格, 嚴(yán)禁非法添加藥物。然而, 一些不良商家在減肥類保健品中非法添加化學(xué)類藥物, 以達(dá)到增加減肥效果和虛假宣傳的目的[1]。

1 保健食品中非法添加化學(xué)類減肥藥的種類及危害

目前, 非法添加在保健品中的減肥類藥物主要分三類：食欲抑制劑類藥物、吸收抑制劑類藥物、能量消耗類藥物。此外, 利尿劑類藥物、輕瀉劑類藥物及其它有減低體重效果的藥物也是減肥類保健品中經(jīng)常非法添加的化學(xué)藥物。

1.1 食欲抑制劑類藥物

這類藥物大多是通過(guò)影響去甲腎上腺素、多巴胺、5-羥色胺等神經(jīng)遞質(zhì)在下丘腦的合成、釋放與再攝取, 以調(diào)節(jié)食欲, 改變攝食行為, 從而影響體重。此類藥物包括西布曲明、芬氟拉明、安非拉酮等, 其中西布曲明是最常見(jiàn)的非法添加減肥藥物。西布曲明是典型的食欲抑制劑類減肥藥, 美國(guó)FDA于1997年批準(zhǔn)上市。2001年4月, 西布曲明在意大利上市, 2002年3月6日便緊急撤市, 在此期間共收到50例不良反應(yīng)報(bào)告（主要為心動(dòng)過(guò)速、高血壓及節(jié)律障礙, 其中7例較為嚴(yán)重）和2例心臟驟停的死亡報(bào)告[2]。此后, 歐洲藥物評(píng)估機(jī)構(gòu)便開始對(duì)其進(jìn)行綜合評(píng)估, 但在此期間, 包括英國(guó)在內(nèi)的一些國(guó)家仍然在售, 直至英國(guó)收到411份不良反應(yīng)報(bào)告（其中95例較為嚴(yán)重, 2例死亡）, 法國(guó)也收到99份報(bào)告（其中10例嚴(yán)重, 無(wú)死亡事例）。美國(guó)FDA自1998年至2001年9月, 共收到西布曲明的不良反應(yīng)報(bào)告397份, 其中143例為心臟節(jié)律不整, 29例死亡[3]（其中19例為心血管原因, 包括3名30歲以內(nèi)的女性）。2009年, FDA公布了包括西布曲明、利莫那班、苯妥英、酚酞、布美他尼等在內(nèi)的69種減肥類藥物的禁止上市, 并揭露其存在健康風(fēng)險(xiǎn), 例如高血壓、癲癇、心動(dòng)過(guò)速、心悸、心臟病發(fā)作或中風(fēng)。西布曲明于2000年在我國(guó)獲批上市。但因副反應(yīng)的高發(fā)性, 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局在2010年10月30日發(fā)布通知, 停止西布曲明制劑和原料藥在我國(guó)的生產(chǎn)銷售和使用。Oberholzer等[4]的研究表明, 西布曲明可導(dǎo)致大鼠肝臟纖維化。

1.2 吸收抑制劑類藥物

這類添加劑主要是通過(guò)抑制人體腸道對(duì)食物的消化和吸收, 使之在進(jìn)入血液之前就排出體外, 達(dá)到減輕體重的目的。吸收抑制劑中最典型的為脂肪酶抑制劑。脂肪酶抑制劑的作用機(jī)理是使脂肪酶失去部分的分解能力, 使部分脂肪在體內(nèi)不能被分解和吸收, 進(jìn)而隨食渣一起被排出體外[5]。常見(jiàn)的脂肪酶抑制劑有奧司利他、利莫那班、賽利斯他、西替利司他等。雙胍類降糖藥能減少胃腸道對(duì)糖的吸收, 增加大便中脂肪及其他物質(zhì)的排泄, 同時(shí)增加周圍組織對(duì)葡萄糖的利用, 短時(shí)間應(yīng)用有抑制食欲、降低體重的作用, 也是非法添加的常見(jiàn)藥物。吸收抑制劑類藥物的危害主要作用于胃腸道, 常見(jiàn)副作用為腹瀉、油便、電解質(zhì)紊亂、低血鉀等[6]。FDA于2010年5月警告奧利司他存在可能引起嚴(yán)重肝損害的風(fēng)險(xiǎn)。

1.3 能量消耗類藥物

能量消耗劑一般為中樞神經(jīng)興奮藥物, 通過(guò)提高機(jī)體的基礎(chǔ)代謝率, 刺激脂肪的氧化、增加能量消耗來(lái)實(shí)現(xiàn)減輕體重的目的[6]。常見(jiàn)的能量消耗劑有麻黃堿、偽麻黃堿、去甲基麻黃堿、茶堿、甲基苯丙胺等。此類藥物一般具有成癮性。此外, 甲狀腺激素、生長(zhǎng)激素等激素類藥物可增加代謝率, 使體重下降, 但是, 藥理劑量的甲狀腺激素雖可提高代謝率, 降低體重, 但同時(shí)也增加蛋白質(zhì)分解, 導(dǎo)致鈣丟失及發(fā)生心血管功能障礙, 對(duì)身體的損害遠(yuǎn)大于減肥的受益, 故現(xiàn)僅用于甲狀腺功能低下肥胖時(shí)甲狀腺激素的替代治療[7]。

1.4 利尿劑類藥物

利尿劑按照其作用部位和作用機(jī)理的不同, 分為不同的類型, 常見(jiàn)利尿劑有呋塞米、布美他尼、氫氯噻嗪、氯噻嗪、環(huán)噻嗪、甲氯噻嗪、氯噻酮、吲達(dá)帕胺等。利尿劑的作用機(jī)制主要為通過(guò)改變相關(guān)酶的活性或細(xì)胞膜的通透性, 加速或抑制細(xì)胞的代謝, 通過(guò)加速排出體內(nèi)水分, 造成體重減輕的表象[8]。利尿劑的副作用主要為嘔吐、頭暈、虛弱等, 引發(fā)腎功能損傷, 造成低鉀血癥等 [9] 。

1.5 輕瀉劑類藥物

輕瀉劑是一種可以幫助腸道排泄的物質(zhì), 通過(guò)潤(rùn)滑腸壁, 刺激腸道蠕動(dòng), 或者軟化大便增加其體積等方法而起到幫助排泄的功效, 從而減輕體重[10]。市售減肥類功能產(chǎn)品中添加的輕瀉劑主要為酚酞。長(zhǎng)期使用或過(guò)量使用酚酞可引起腹痛、腹瀉、嘔吐、電解質(zhì)失衡 (低鉀血癥、低鈣血癥、代謝性酸中毒或堿中毒)、脫水、吸收不良、蛋白失活胃腸病、脂肪痢、厭食癥、體重減輕、多尿癥、心律失常、肌肉無(wú)力、前列腺增生和組織病理學(xué)損傷[11]。

2 保健食品中非法添加化學(xué)藥物的分析檢測(cè)技術(shù)

建立高效、靈敏的檢測(cè)方法, 實(shí)現(xiàn)對(duì)保健食品中非法添加化學(xué)藥物的快速定性定量檢測(cè), 是整頓保健品市場(chǎng)、打擊犯罪、維護(hù)公眾生命財(cái)產(chǎn)安全的重要保障。國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道了很多保健食品中非法添加減肥類藥物的檢測(cè)技術(shù), 有電化學(xué)法[12]、光譜法[13, 14, 15]、質(zhì)譜法[16]、核磁技術(shù)[17, 18]、毛細(xì)管電泳法及其聯(lián)用技術(shù)[19, 20]、色譜法及其聯(lián)用技術(shù)[21, 22, 23, 24, 25, 26]等。

2.1 流動(dòng)注射-電化學(xué)發(fā)光法

電化學(xué)發(fā)光（electrochemical luminescence, ECL）分析法是化學(xué)發(fā)光法與電化學(xué)相互結(jié)合的產(chǎn)物, 具有靈敏度高、檢出限低和線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)[27]。流動(dòng)注射（flow injection, FI）是近20年才產(chǎn)生的一種新型的微量、高速和自動(dòng)化的分析技術(shù)。FI作為一種強(qiáng)有力的樣品處理技術(shù), 為ECL提供了一個(gè)非常好的控制手段。流動(dòng)注射-電化學(xué)發(fā)光（FI-ECL）分析體系結(jié)合了二者的優(yōu)勢(shì), 具有儀器裝置簡(jiǎn)單、靈敏度高、線性范圍寬等優(yōu)勢(shì)。Wang等[12]搭建了一種新型流動(dòng)的電化學(xué)發(fā)光池, 在堿性Na2CO3-NaHCO3（pH8.0~12.0）緩沖體系中, 實(shí)現(xiàn)對(duì)西布曲明的快速定量分析, 在1.0× 10-8~1.0× 10-6 g/mL濃度范圍內(nèi), 線性系數(shù)達(dá)0.999 5, 檢出限達(dá)到2.4× 10-9 g/mL, 并且重現(xiàn)性較好, 1.0× 10-6 g/mL濃度時(shí)RSD為2.1%（n=11）。

2.2 傅里葉變換衰減全反射紅外光譜法

傅里葉變換衰減全反射紅外光譜儀( attenuated total internal reflectance fourier transform infraredspectroscopy, ATR-FTIR) 利用衰減全反射技術(shù)來(lái)代替常規(guī)紅外光譜的透射技術(shù), 簡(jiǎn)化了一些特殊樣品的制樣和測(cè)試, 檢測(cè)靈敏度可達(dá)10-9 g 數(shù)量級(jí), 可以實(shí)現(xiàn)樣品原位、實(shí)時(shí)、無(wú)損測(cè)量[28], 克服了一些特殊樣品難溶、難熔或難粉碎的缺點(diǎn)。Cebi等[15]采用ATR-FTIR光譜技術(shù)與化學(xué)計(jì)量學(xué)相結(jié)合的方式, 對(duì)綠茶、綠咖啡和混合花茶中西布曲明的檢測(cè)進(jìn)行了研究, 數(shù)據(jù)表明, 在西布曲明含量為0.214~6.86 mg/kg范圍內(nèi), 被測(cè)試的225份樣品, 無(wú)一例錯(cuò)誤預(yù)測(cè), 可以成功地確定活性物質(zhì)的存在水平。Deconinck[13]等采用ATR-FTIR光譜技術(shù)對(duì)膠囊、凝膠膠囊、粉末、水果飲料、速溶咖啡等減肥產(chǎn)品進(jìn)行了分析, 并采用不同的基本化學(xué)計(jì)量技術(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)解釋, 發(fā)現(xiàn)ATR-FTIR技術(shù)與K近鄰算法相結(jié)合, 可對(duì)所有陽(yáng)性產(chǎn)品進(jìn)行正確判斷, 而且假陽(yáng)性出現(xiàn)比例最低。這可應(yīng)用于進(jìn)一步儀器檢測(cè)前的初篩。

2.3 流動(dòng)注射-串聯(lián)質(zhì)譜法

流動(dòng)注射-串聯(lián)質(zhì)譜法（FI-MS/MS）是以流動(dòng)注射的方式, 將樣品直接注入質(zhì)譜儀中進(jìn)行檢測(cè)的一種分析手段, 由于沒(méi)有色譜部分的分離過(guò)程, 進(jìn)而實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)的目的, 同時(shí)可降低色譜流動(dòng)相變化對(duì)質(zhì)譜檢測(cè)結(jié)果的影響, 可用于復(fù)雜基質(zhì)中低殘留物質(zhì)的高通量分析[29]。Song等[16]報(bào)道了一種采用FI與串聯(lián)質(zhì)譜相結(jié)合的方式, 測(cè)定減肥產(chǎn)品中西布曲明、N-單曲甲基西布曲明、N, N-雙去甲基西布曲明和酚酞的方法。在2~250 ng/mL范圍內(nèi), 四種藥物的檢出限分別達(dá)到0.3、0.3、0.3、0.6 ng/mL, 定量限達(dá)到1、1、1、2 ng/mL。

2.4 離子淌度譜法

近年來(lái), 離子淌度譜法（ion mobility spectrometry, IMS)也叫離子遷移譜法, 許多現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)儀器都是基于IMS的原理制備而成。由于其儀器構(gòu)造簡(jiǎn)單小巧, 操作方便, 價(jià)格相對(duì)低廉, 在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)、過(guò)程監(jiān)控、突發(fā)事件處理等關(guān)鍵領(lǐng)域的應(yīng)用也越來(lái)越普遍。Jamie等[30]將減肥類產(chǎn)品進(jìn)行甲醇提取后, 采用手持式和臺(tái)式離子遷移譜儀, 對(duì)包括西布曲明及其兩種代謝物、氟西汀、奧利司他等藥物在內(nèi)的13種減肥藥物進(jìn)行了檢測(cè), 其中10種藥物的檢出限低于20 ng, 西布曲明的檢出限低于2 ng, 可應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步儀器檢測(cè)前的樣品初篩。

2.5 毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜聯(lián)用法

毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜（CE-MS）聯(lián)用技術(shù)是在液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新型分析技術(shù), 它結(jié)合了毛細(xì)管電泳具有的分離效率高、分離速度快、樣品消耗量少以及質(zhì)譜檢測(cè)具有的高靈敏度和強(qiáng)結(jié)構(gòu)解析能力等優(yōu)點(diǎn), 現(xiàn)已成為倍受分析化學(xué)工作者關(guān)注的新型微量分析技術(shù)[31]。Vagner等[20]報(bào)道了采用CE-MS/MS對(duì)非法添加的6種麻黃堿類藥物進(jìn)行檢測(cè)的方法。樣品采用QuEChERS樣品前處理技術(shù)進(jìn)行純化, 之后在鍵合相為聚乙烯醇的毛細(xì)管中進(jìn)行電泳分離, 以避免目標(biāo)物被吸附在毛細(xì)管內(nèi)壁。再經(jīng)ESI-MS/MS檢測(cè), 6種麻黃堿類藥物的檢測(cè)限到0.02~0.06 μ g/L, 回收率在85%~123%, RSD≤ 6.1%。

2.6 核磁共振技術(shù)

核磁共振波譜法是對(duì)復(fù)雜基質(zhì)進(jìn)行分析的一種有效方法。它具有測(cè)定迅速、操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好、樣品制備簡(jiǎn)單、檢測(cè)方式靈活等特點(diǎn), 并且隨著近年來(lái)磁場(chǎng)強(qiáng)度的提高、高敏探頭的出現(xiàn), 其靈敏度也不斷提升, 在減肥產(chǎn)品的非法添加物檢測(cè)方面也發(fā)揮越來(lái)越大的作用[32, 33, 34]。Rabab等[35]對(duì)160種標(biāo)榜100%純植物成分的減肥產(chǎn)品進(jìn)行了1H NMR檢測(cè), 結(jié)果顯示56%的產(chǎn)品含有藥物成分, 其中43例檢出了西布曲明, 其含量在0.1~22 mg之間, 9例檢出酚酞, 含量在0.05~56 mg之間, 12例含有西地那非, 4份樣品含有氟西汀, 1例含有奧利司他, 1例含有氯卡色林（一種新型減肥藥）。其中, 23例樣品為復(fù)合添加, 含有2種或以上藥物成分。

2.7 氣相色譜及聯(lián)用技術(shù)

氣相色譜及質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是一種很成熟的分離分析技術(shù), 也是實(shí)驗(yàn)室最常用的分析手段之一, 在很多領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用。Li [23]報(bào)道了一種采用氣相色譜與串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用, 檢測(cè)減肥產(chǎn)品中7種非法添加藥物的方法。片劑、液體制劑、混合植物粉末等樣品經(jīng)2%甲酸溶液提取后, 采用強(qiáng)陽(yáng)離子交換固相萃取柱凈化, 在VF-5MS氣相色譜柱進(jìn)行分離, 并采用EI-MS/MS檢測(cè), 在23 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)對(duì)7種藥物的測(cè)定, 回收率在80.1%~106%, 檢出限為7.5~359 μ g/kg。采用建立的方法對(duì)六個(gè)批次的保健產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè), 其中五種產(chǎn)品中檢出西布曲明。

2.8 液相色譜及聯(lián)用技術(shù)

液相色譜及液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)具有分析速度快、結(jié)果重現(xiàn)性好、靈敏度高、樣品處理簡(jiǎn)單等多項(xiàng)優(yōu)勢(shì), 是分析領(lǐng)域定性定量檢測(cè)最常用的技術(shù)之一。Kim等[22]采用LC-MS/MS方法對(duì)188種減肥產(chǎn)品進(jìn)行了檢測(cè), 檢測(cè)物包含29種非法添加藥物。樣品處理方式簡(jiǎn)單, 直接將1 g樣品在甲醇中超聲提取30 min, 經(jīng)0.22 μ m濾膜過(guò)濾后進(jìn)行儀器分析。23種藥物的檢出限為0.03~7.5 ng /mL, 定量限為0.08~30.00 ng /mL。在188種減肥產(chǎn)品中, 有62個(gè)產(chǎn)品檢出非法添加藥物, 共涉及9種藥物, 其中西布曲明的檢出率最高, 占22.7%。Zhang等[36]建立了一種簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏度高的LC-MS/MS方法對(duì)固體、液體和油性三種基質(zhì)的減肥產(chǎn)品中的麻黃堿、偽麻黃堿、去甲麻黃堿、去甲偽麻黃堿和甲基麻黃堿等五種麻黃堿類物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè), 并在503份案樣品中得到應(yīng)用。其中, 固體基質(zhì)中五種麻黃堿類的線性范圍為10~1000 ng/g, 檢出限低于5 ng, 液體基質(zhì)中為1~100 ng/mL, 檢出限低于0.5 ng/mL。

3 總結(jié)與展望

當(dāng)前關(guān)于減肥產(chǎn)品中非法添加藥物的檢測(cè)技術(shù)發(fā)展已較為成熟, 現(xiàn)場(chǎng)快速初篩和實(shí)驗(yàn)室確證檢驗(yàn)的方法在國(guó)內(nèi)外都有大量相關(guān)報(bào)道。但當(dāng)前研究多局限于減肥產(chǎn)品中非法添加藥物原體的檢測(cè), 而對(duì)藥物進(jìn)入體內(nèi)后其原體和代謝產(chǎn)物的研究較少。針對(duì)因食用含非法添加藥物的保健品而引起的中毒案件, 準(zhǔn)確對(duì)生物樣品中的藥物原體及其代謝標(biāo)志物進(jìn)行定性定量分析, 是此類案件定性的關(guān)鍵證據(jù), 也是今后研究的重要方向。

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