茶葉有效成分-分離制備技術(shù) 茶葉中多酚類物質(zhì)的提取純化（一） 一、茶葉多酚類物質(zhì)提取的影響因素1.原料粗細(xì)不同在相同提取條件下，磨碎茶樣提取率高于未磨碎茶樣。如用10%乙醇-水（V/V）在95°C熱提45min,磨碎茶樣提取液茶多酚含量為19.15%,未磨碎茶樣僅為16.89%。2.不同的提取溶劑H.Horita報(bào)道，無(wú)水的有機(jī)溶劑乙醍、乙酸乙酯和丙酮提取24h,兒茶素得率僅4%?5%。而用含水溶劑（如丙酮、低級(jí)醇）提取1?4h,提取率可達(dá)100%。用90°C熱水浸提lh,提取率僅為58%。提取能力依次為含水低級(jí)醇或丙酮＞熱水＞無(wú)水有機(jī)溶劑（乙醒、丙酮、乙酸乙酯）。如表3-2。 一、茶葉多酚類物質(zhì)提取的影響因素溶劑提取溶劑得率/%溶劑提取溶劑得率/%溶劑/%*時(shí)間/h兒茶素咖啡堿溶劑/%時(shí)間/h兒茶素咖啡堿乙酸乙酯,*100840—乙繼*100244一1-丙酮**100244—_2-丙酮501100791-丁醇801100100熱水（90°C）—158100表3?2不同溶劑及濃度對(duì)茶中兒茶素的提取效果（陳宗道等，1999）*溶劑體積/水體積百分比廣采用Soxhlet提取設(shè)備提取。 一、茶葉多酚類物質(zhì)提取的影響因素茶多酚提取得率還與溶劑濃度有關(guān)，隨溶液中乙醇濃度提高，提取率增加，50%乙醇-水（V/V）提取效率最高，但溶劑濃度對(duì)產(chǎn)品兒茶素的含量無(wú)明顯影響。3.固液比在茶汁提取中，既要考慮作為提取溶劑的一定用水量以保證較高的提取率，又要考慮到后續(xù)純化分離工序的濃縮或干燥效率等。一般認(rèn)為使茶提取物含量在5%左右為宜，固液比為1:10～15,壓濾后的濾渣可以1:5固液比再次浸提。 一、茶葉多酚類物質(zhì)提取的影響因素4.提取時(shí)間延長(zhǎng)提取時(shí)間，可提高提取率。沸水提取時(shí)間一般為45?90min。5.提取溫度熱提取液茶多酚含量高于冷提取液。95℃45min,提取液茶多酚為15.06%，但同樣條件下40 ℃ ，提取液茶多酚僅為11.48%。此外，熱提可使產(chǎn)率提高，但雜質(zhì)含量亦會(huì)增加。從經(jīng)濟(jì)節(jié)能考慮，以低溫（50°C）、適當(dāng)延長(zhǎng)提取時(shí)間為宜。 一、茶葉多酚類物質(zhì)提取的影響因素6.加酶處理在茶汁提取時(shí)添加酶，如a-淀粉酶、糖化酶及果膠酶，均可使茶湯浸出物增加1.7%?16.2%，但對(duì)茶多酚溶出無(wú)明顯影響。 茶葉有效成分-分離制備技術(shù) 茶葉中多酚類物質(zhì)的提取純化（三） 三、多酚類物質(zhì)的純化多酚類的主要成分是黃烷醇類，而黃烷醇類中70%左右是兒茶素類。兒茶素類結(jié)構(gòu)中B環(huán)上羥基在提取時(shí)，由于反復(fù)受較高溫度及接觸空氣中氧等影響極易氧化成釀型結(jié)構(gòu)。據(jù)Ekana-YakeA.報(bào)道，這些醍型物質(zhì)在非酶活性的條件下也能形成茶黃素和茶紅素，所以多酚類的粗制品常常呈粉紅色或淺褐色。盡管多酚類粗制品中茶黃素和茶紅素對(duì)多酚類的生物活性影響不大，但由于它們的顏色常常限制了多酚類應(yīng)用范圍，有時(shí)生產(chǎn)上常常需要高純度的多酚類，甚至僅需要其中的兒茶素類。因此，在某些情況下要對(duì)多酚類粗制品進(jìn)行純化，或者直接提取其中的兒茶素。 三、多酚類物質(zhì)的純化　　先將多酚類粗制品溶于水，用乙醍萃取，乙醍層減壓回收,真空干燥或冷凍干燥即得較純的多酚類。水層用乙酸乙酯反復(fù)萃取，除去水層，收集乙酸乙酯層；將乙酸乙酯溶液層進(jìn)行減壓低溫濃縮，最后在真空干燥箱中干燥，此時(shí)可得到多酚類初級(jí)氧化聚合物。1.多酚類粗制品的純化　　由于兒茶素由多種單體組成，而各種單體性質(zhì)相差不大，因而分離較困難。兒茶素生產(chǎn)中目前較多使用兩種方法，一為吸附型樹(shù)脂及親脂性凝膠層析法,另一為逆流色譜法。2.兒茶素的制備 三、多酚類物質(zhì)的純化（1）吸附型樹(shù)脂及親脂性凝膠層析法從粗多酚中制備兒茶素，目前主要用吸附型樹(shù)脂及親脂性凝膠過(guò)濾材料。HoritaH.等人用80%的乙醇從綠茶中抽提粗多酚，取25g該粗多酚，分別與不同的吸附劑(200mL)攪拌lh,然后用去離子水去雜后，再用80%乙醇從中萃取，比較了各種吸附劑對(duì)兒茶素的吸附及純化情況。用ToyopearlHW-40或SephadexLH-20作為兒茶素的吸附劑最好，兒茶素在被吸附物中的含量分別是94.8%和90.8%,而咖啡堿含量又最低，分別是2.2%和5.2%°對(duì)于被ToyopearlHW-40或SephadexLH-20所吸附的雜質(zhì)和少量的咖啡堿可用體積分?jǐn)?shù)15%的乙醇洗脫。 三、多酚類物質(zhì)的純化經(jīng)15%乙醇洗脫后，再用80%乙醇萃取，此時(shí)乙醇萃取液中兒茶素含量可達(dá)98.8%,而咖啡堿含量?jī)H有0.01%。根據(jù)YayabeF.等介紹，對(duì)于粗多酚用SephadexLH-20吸附后，用30%和60%的丙酮逐步洗脫可進(jìn)一步分離出簡(jiǎn)單兒茶素(非酯型兒茶素)和復(fù)雜兒茶素(酯型兒茶素)。 三、多酚類物質(zhì)的純化　?。?）

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