李芳嬋，韋紅勤，陳 清，羅宇東，龐曉云，黃 菁，王蘇妃

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，南寧 530200；2.廣西壯瑤藥工程技術(shù)研究中心，南寧 530200；3.廣西中醫(yī)藥大學(xué)制藥廠，南寧 530000）

根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示，高血脂癥是全球五大致死病因之一，容易引發(fā)心腦血管疾病，嚴(yán)重威脅人們的身體健康［1］。五味祛脂顆粒配方是根據(jù)中國“藥食同源”傳統(tǒng)飲食文化和壯瑤藥用藥理論組方擬開發(fā)的具有輔助降血脂功效的保健食品，由藤茶、葛根、決明子、百合、荷葉等藥食同源的藥材組方。本試驗(yàn)通過建立高血脂癥大鼠模型，觀察五味祛脂顆粒對(duì)高血脂大鼠血清高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、甘油三酯含量的影響，以期為五味祛脂顆粒的進(jìn)一步開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品和試劑

高脂飼料按《關(guān)于印發(fā)抗氧化功能評(píng)價(jià)方法等9個(gè)保健功能評(píng)價(jià)方法的通知》國食藥監(jiān)?；?012］107號(hào)配制，配方：維持飼料49.3%、蔗糖20%、豬油15%、酪蛋白12.5%、膽固醇1.2%、磷酸氫鈣1.3%、石粉0.5%、膽酸鈉0.2%。維持飼料（北京科澳協(xié)力飼料有限公司生產(chǎn)），高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）試劑盒（南京建成生物工程研究所，生產(chǎn)批號(hào)20181129）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）試劑盒（南京建成生物工程研究所，生產(chǎn)批號(hào)20181116）、總膽固醇（TC）試劑盒（南京建成生物工程研究所，生產(chǎn)批號(hào)20181129）、甘油三酯（TG）試劑盒（南京建成生物工程研究所，生產(chǎn)批號(hào)20181116）。

1.2 試驗(yàn)儀器

5810R高速冷凍離心機(jī)（德國艾本德公司）、EPOCH全波長酶標(biāo)儀（美國BIOTEK公司）

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康雄性SD大鼠（SPF級(jí)），體重（150±10）g，購自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，生產(chǎn)許可證：SCXK（湘）2016-0002，質(zhì)量合格證：No.4300470 0040620。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 五味祛脂顆粒的制備 按比例稱取藤茶、葛根、決明子、百合、荷葉藥材，加10倍量水提取2次，每次1.5 h，過濾濃縮至稠膏，加糖粉、甜菊苷、淀粉等輔料制成。

1.4.2 造模 取SPF級(jí)健康雄性SD大鼠98只，適應(yīng)性喂養(yǎng)維持飼料5 d后，按體重隨機(jī)分為空白對(duì)照組（8只）和模型組（90只）。模型組給予高脂飼料，空白對(duì)照組給予維持飼料，飼喂14 d后，大鼠不禁食眼內(nèi)眥采血，迅速分離血清，用試劑盒測定大鼠血清的高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量。模型組與空白對(duì)照組比較，血清甘油三酯升高，血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇升高，差異均有顯著性，判定高脂血癥大鼠模型成立。

1.4.3 給藥 取上述高脂血癥模型大鼠40只，根據(jù)TC水平將模型組分為模型對(duì)照組、陽性組、高劑量組、中劑量組、低劑量組共5組，每組8只。五味祛脂顆粒低、中、高劑量組劑量分別為7.08、14.17、21.25 g/kg（按生藥量算，相當(dāng)于人體劑量的5、10、15倍），以非諾貝特組為陽性藥，劑量為100 mg/kg。各組每次按照15 mL/kg灌胃給予相應(yīng)的受試物，空白對(duì)照組灌胃給予相同劑量的生理鹽水，模型對(duì)照組灌胃給予相同劑量的去離子水，每日1次，連續(xù)給樣30 d。給樣期間，空白對(duì)照組繼續(xù)飼喂維持飼料，模型對(duì)照組及各劑量組飼喂高脂飼料。每3 d記錄動(dòng)物體重1次，并根據(jù)體重調(diào)整給樣量。末次給樣后，大鼠不禁食眼內(nèi)眥采血，迅速分離血清，用試劑盒測定大鼠血清中HDL-C、LDL-C、TC、TG含量。分組、給藥劑量、給藥體積及給藥次數(shù)具體見表1。

表1 五味祛脂顆粒各劑量組給藥劑量、給藥體積、給藥次數(shù)

1.4.4 檢測指標(biāo) 末次給藥后，收集大鼠血液至離心管，4℃冰箱放置1 h，3 000 r/min離心15 min，取血清，按照HDL-C、LDL-C、TC、TG試劑盒檢測要求，檢測血清中HDL-C、LDL-C、TC、TG含量。

1.5 輔助降低血脂功能結(jié)果判定

根據(jù)《關(guān)于印發(fā)抗氧化功能評(píng)價(jià)方法等9個(gè)保健功能評(píng)價(jià)方法的通知》（國食藥監(jiān)保化［2012］107號(hào)）中輔助降血脂功能檢驗(yàn)方法判斷輔助降血脂功能動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果。

模型組與空白對(duì)照組比較，血清甘油三酯升高，血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇升高，差異均有顯著性，判定高脂血癥大鼠模型成立。

各劑量組與模型對(duì)照組比較，任一劑量組血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇降低，且任一劑量組血清甘油三酯降低，差異均有顯著性，同時(shí)各劑量組血清高密度脂蛋白膽固醇不顯著低于模型對(duì)照組，可判定該受試樣品輔助降低血脂功能試驗(yàn)結(jié)果陽性。

各劑量組與模型對(duì)照組比較，任一劑量組的血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇降低，差異均有顯著性，同時(shí)各劑量組的血清甘油三酯不顯著高于模型對(duì)照組，各劑量組血清高密度脂蛋白膽固醇不顯著低于模型對(duì)照組，則可判定該受試樣品輔助降低膽固醇功能試驗(yàn)結(jié)果陽性。

各劑量組與模型對(duì)照組比較，任一劑量組血清甘油三酯降低，差異均有顯著性，同時(shí)各個(gè)劑量組低密度脂蛋白膽固醇及總膽固醇不顯著高于模型對(duì)照組，血清高密度脂蛋白不顯著低于模型對(duì)照組，則可判定該受試樣品輔助降低甘油三酯功能動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果陽性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（xˉ±s）表示，先用Leven′s test方法進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，如果符合方差齊性，則采用單因素方差分析（ANOVA）和post HocLSD進(jìn)行多個(gè)試驗(yàn)組均數(shù)間的兩兩比較。如若方差不齊，則用T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。P＜0.05表示差異有顯著意義，P＜0.01表示差異有極顯著意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 造模14 d后高脂飼料對(duì)大鼠血脂的影響

從表2可以看出，飼喂高脂飼料14 d后，與空白對(duì)照組比較，模型組大鼠血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）均極顯著升高（P＜0.01），判定高脂血癥大鼠模型成立。按總膽固醇（TC）含量將模型組分為高、中、低劑量組、非諾貝特組及模型對(duì)照組，模型對(duì)照組及各給藥組大鼠血清TC、TG均極顯著高于空白對(duì)照組（P＜0.01），LDL-C與空白組比較，無顯著差異（P＞0.05），HDL-C與空白組比較，無顯著差異（P＞0.05），各給藥組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C與模型對(duì)照組比較，無顯著差異（P＞0.05）。

表2 給予高脂飼料14 d后大鼠分組血脂數(shù)據(jù)（單位：mmol/L）

2.2 五味祛脂顆粒對(duì)大鼠體重的影響

從表3可以看出，與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組、五味祛脂顆粒各劑量組大鼠初始體重差異無顯著性，模型組大鼠終末體重增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與模型對(duì)照組比較，五味祛脂顆粒各劑量組動(dòng)物終末體重降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表明在本試驗(yàn)條件下五味祛脂顆粒對(duì)大鼠體重有明顯影響，五味祛脂顆?？蓽p緩高血脂模型大鼠體重的增長，可能具有一定的減肥功效。

表3 五味祛脂顆粒對(duì)大鼠體重的影響

2.3 末次給藥后五味祛脂顆粒對(duì)大鼠血脂含量的影響

從表4可以看出，末次給藥后，模型對(duì)照組大鼠的血清TC、TG、LDL-C含量均極顯著高于空白對(duì)照組（P＜0.01），HDL-C含量極顯著低于空白對(duì)照組（P＜0.01）。與模型對(duì)照組比較，五味祛脂顆粒各劑量組TC、TG、LDL-C隨劑量增加而降低，中劑量組、高劑量組有顯著（或極顯著）差異（P＜0.05或P＜0.01），低劑量組也能夠顯著降低TG含量（P＜0.05）；五味祛脂顆粒各劑量組的HDL-C含量與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。根據(jù)《關(guān)于印發(fā)抗氧化功能評(píng)價(jià)方法等9個(gè)保健功能評(píng)價(jià)方法的通知》（國食藥監(jiān)?；?012］107號(hào)）中輔助降血脂功能檢驗(yàn)方法，判斷五味祛脂顆粒具有輔助降血脂功能。

表4 末次給藥后五味祛脂顆粒對(duì)大鼠血脂含量的影響（單位：mmol/L）

3 小結(jié)與討論

高血脂癥是指人體的血脂紊亂或血脂異常，包括總膽固醇含量升高、甘油三酯含量升高、低密度脂蛋白含量升高，以及高密度脂蛋白含量下降等，會(huì)誘發(fā)冠心病、腦中風(fēng)、高血壓、高血糖等嚴(yán)重疾病［2，3］。目前高血脂癥主要應(yīng)用化學(xué)藥物治療，包括他汀類、貝特類、依折麥布、膽酸螯合劑等，這些臨床治療效果明顯，但作用靶點(diǎn)單一，容易引起不良反應(yīng)；而中藥在高血脂的治療方面歷史悠久，安全性高，多靶點(diǎn)，價(jià)格低廉，且可多方聯(lián)合應(yīng)用，標(biāo)本兼治［4，5］，因此備受關(guān)注。

五味祛脂顆粒由藤茶、葛根、決明子、荷葉、百合等藥食同源中藥組方，具有利濕平肝、清熱解暑、活血通絡(luò)的功效。藤茶可以通過降低血管滲透性和脆性來保護(hù)血管免受細(xì)胞被氧化損害引起的傷害，而抑制高脂血癥的形成，具有降脂及治療非酒精性脂肪性肝病的作用［6-10］。葛根可以降低食源性高脂血癥大鼠的血脂水平，降低脂質(zhì)過氧化程度，提高機(jī)體的抗氧化能力，可防治動(dòng)脈粥樣硬化和減少心腦血管疾病的發(fā)生，葛根素能有效降低大鼠血清中甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白，而明顯升高HDL含量和HDL-C/TC比，具有明顯的降脂作用［11-13］。決明子中橙黃決明素具有降血脂活性，且其活性與普伐他汀相當(dāng)［14-16］。荷葉具有降脂減肥、抗氧化及衰老、抗炎抑菌、鎮(zhèn)靜安神抗疲勞等藥理活性［17，18］。百合有助于改善亞健康人群的健康狀態(tài)［19，20］。

研究表明血清中TC、TG、LDL-C含量的升高和HDL-C含量的降低更容易誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化和心腦血管疾病，LDL-C是將肝臟合成的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)到全身組織的主要形式。試驗(yàn)結(jié)果表明，五味祛脂顆粒能夠降低高血脂模型大鼠血清中TC、TG、LDL-C的含量，具有輔助降血脂作用，可為后續(xù)的開發(fā)和產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。

相關(guān)知識(shí)

碧生源牌輔助降血糖顆粒
清血消脂片降血脂作用的試驗(yàn)研究
五味祛脂茶治療高脂血癥
番石榴葉提取物降糖活性,急性毒性及顆粒制備研究
中藥配方顆粒行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)研究思路.pdf
降脂靈顆粒的適合人群有哪些
如何祛除脂肪粒呢？祛除脂肪粒的小妙招有哪些？
丹香清脂顆粒脂肪肝
臉上起脂肪粒怎樣祛除
丹香清脂顆粒的功效與作用

網(wǎng)址: 五味祛脂顆粒輔助降血脂動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究 http://www.u1s5d6.cn/newsview1419126.html