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氯霉素溶液（34mg/ml)試劑

來(lái)源：泰然健康網(wǎng) 時(shí)間：2025年07月14日 06:05

特別提示：包括氯霉素溶液（34mg/ml)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：氯霉素溶液（34mg/ml)
英文名稱：Chloramphenicol Solution
產(chǎn)品貨號(hào)：WH0226
產(chǎn)品規(guī)格：5ml

根據(jù)您的關(guān)注的氯霉素溶液（34mg/ml)試劑，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：

名稱：L-甲狀腺素
貨號(hào)：QN0019
規(guī)格：1g
CAS：51-48-9
分子式：C15H11I4NO4
分子量：776.87
別名：2-甲狀腺素;左旋甲狀腺素;左甲狀腺素;甲狀腺素
儲(chǔ)存條件：2～8℃

名稱：依克立達(dá)
貨號(hào)：QN0021
規(guī)格：10mg
CAS：143664-11-3
分子式：C34H33N3O5
分子量：563.64
儲(chǔ)存條件：-20℃

名稱：博萊霉素
貨號(hào)：QN0065
規(guī)格：1.25ml|8×1.25ml
本品Zeocin是一種屬于爭(zhēng)光霉素家族的糖蛋白抗生素，在體內(nèi)能作用于大多數(shù)細(xì)菌(包括E. coli)、真菌(如：酵母菌)、植物細(xì)、動(dòng)物細(xì)胞。

CAS：9041-93-4
分子式：C55H83N19O21S2Cu
分子量：1137.41
儲(chǔ)存條件：-20℃避光
純度：100 mg/mL
性狀：淡綠色液體
濃度：100 mg/mL

Zeocin試劑是博來(lái)霉素抗生素家族的一個(gè)成員。其抗性由編碼一種 13,665 道爾頓蛋白質(zhì)的 Sh ble 基因賦予。在表達(dá)這種蛋白質(zhì)的細(xì)胞中，Zeocin無(wú)法結(jié)合和切割細(xì)胞 DNA。 Zeocin對(duì)大多數(shù)好氧細(xì)胞有效，可用于選擇哺乳動(dòng)物和昆蟲(chóng)細(xì)胞系、酵母以及細(xì)菌。選擇細(xì)胞時(shí)，Zeocin的用量為 50-2000 ug/ml(通常 300 ug/ml)，具體取決于細(xì)胞類型。

名稱：嘌呤霉素
貨號(hào)：QN0078
規(guī)格：25mg|100mg
本品是蛋白質(zhì)合成抑制劑。抑制細(xì)菌、藻類原生物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)。

CAS：58-58-2
分子式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.43
儲(chǔ)存條件：-20℃
純度：≥98%(TLC)
性狀：白色或白中帶有黃色的粉末
別名：二鹽酸嘌呤霉素;嘌呤霉素鹽酸鹽
溶解性：溶于水，參考濃度50mg/ml。

嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑鏈霉菌(Streptomyces alboniger)發(fā)酵代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素，通過(guò)抑制蛋白質(zhì)合成而殺死革蘭氏陽(yáng)性菌，各種動(dòng)物和昆蟲(chóng)細(xì)胞。某種特殊情況下有效作用大腸桿菌。作用機(jī)制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的類似物，能夠與核糖體的A位點(diǎn)結(jié)合并摻入到延伸的肽鏈中。嘌呤霉素同A位點(diǎn)結(jié)合后，不會(huì)參與隨后的任何反應(yīng)，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成的提前終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

嘌呤霉素產(chǎn)生菌Streptomyces alboniger內(nèi)發(fā)現(xiàn)的pac基因編碼嘌呤霉素N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAC)，賦予機(jī)體對(duì)嘌呤霉素產(chǎn)生抗性。這一特性如今普遍應(yīng)用于篩選特定攜帶pac基因質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。

嘌呤霉素在細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選中的普遍應(yīng)用與慢病毒載體的特性有關(guān)，現(xiàn)在商業(yè)化的慢病毒載體多數(shù)都攜帶pac基因。在某些特定情況下，嘌呤霉素亦可以用來(lái)篩選轉(zhuǎn)化攜帶pac基因質(zhì)粒的大腸桿菌菌株。

使用方法：

1.建議使用濃度
哺乳動(dòng)物細(xì)胞：1-10 μg/mL，最佳濃度需要?dú)缜€來(lái)確定;
大腸桿菌：LB瓊脂培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)化pac基因的大腸桿菌，使用濃度為125μg/mL。注：使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩(wěn)轉(zhuǎn)株需要精確的pH值調(diào)節(jié)，而且受宿主細(xì)胞本身的影響。

2.溶解方法
用蒸餾水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，經(jīng)0.22 μm濾膜過(guò)濾除菌后分裝于-20℃凍存;也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的儲(chǔ)存液。

3. 嘌呤霉素殺滅曲線的確定(以shRNA轉(zhuǎn)染或者慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)為例)
嘌呤霉素有效篩選濃度跟細(xì)胞類型、生長(zhǎng)狀態(tài)、細(xì)胞密度、細(xì)胞代謝情況及細(xì)胞所處細(xì)胞周期位置等有關(guān)。為了篩選到穩(wěn)定表達(dá)的shRNA細(xì)胞株，確定殺死未轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的最低濃度嘌呤霉素至關(guān)重要。建議初次做實(shí)驗(yàn)的客戶一定要建立適合自身實(shí)驗(yàn)體系的殺死曲線(kill curve)。
1)Day 1：24孔板內(nèi)以5~8 x 104 cells/孔的密度鋪板，鋪?zhàn)銐蛄康目滓赃M(jìn)行后續(xù)的梯度實(shí)驗(yàn)。37℃細(xì)胞孵育過(guò)夜;
2)Day 2：
a)準(zhǔn)備篩選培養(yǎng)基：含不同濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基(如0-15μg/mL，至少5個(gè)梯度);
b)往孵育過(guò)夜后的細(xì)胞內(nèi)更換新鮮配制的篩選培養(yǎng)基;之后37℃孵育細(xì)胞;
3)Day 4：更換新鮮的篩選培養(yǎng)基，并觀察細(xì)胞存活率。
4)根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，約2-3天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基;
5)每日監(jiān)測(cè)細(xì)胞，觀察存活細(xì)胞率，從而確定抗生素篩選開(kāi)始4-6天內(nèi)有效殺死非轉(zhuǎn)染或者所有非轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的藥物最低濃度。

4. 哺乳動(dòng)物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的篩選
等轉(zhuǎn)染含有pac基因的質(zhì)粒后，細(xì)胞在含有嘌呤霉素的培養(yǎng)基中增殖，以篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染子。
1)細(xì)胞轉(zhuǎn)染48h后，將細(xì)胞(原樣或稀釋)置于含有適當(dāng)濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
注意：當(dāng)細(xì)胞處于分裂活躍期時(shí)，抗生素作用最明顯。細(xì)胞過(guò)于密集，抗生素產(chǎn)生的效力會(huì)明顯下降。最好進(jìn)行細(xì)胞分盤(pán)使其密度不超過(guò)25%。
2)每隔2-3天，移除和更換含有嘌呤霉素的培養(yǎng)基。
3)篩選7天后評(píng)估細(xì)胞形成的病灶。病灶可能需要額外的一周或者更多時(shí)間，這依賴于宿主細(xì)胞系和轉(zhuǎn)染篩選效率。注意：每日進(jìn)行細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的觀察。嘌呤霉素的篩選至少需要48h，有效濃度嘌呤霉素的篩選周期一般在3-10天。
4)轉(zhuǎn)移和放置5-10個(gè)抗性克隆到一個(gè)35mm的培養(yǎng)皿中，用選擇培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)7天。此次富集培養(yǎng)是為日后的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備。

注意事項(xiàng)：
1. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2. 嘌呤霉素為有毒化合物，操作時(shí)請(qǐng)小心拿放。

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