1、人外周血單核細胞產(chǎn)生白細胞介素21。大西洋月刊，1995年；15(3): 971974 14Jankun J，KeckRW，Skrzypczak2Jankun E，等.尿激酶抑制劑在嚴重的免疫復合物中減少前列腺癌異種移植物的大小.癌癥研究，1997；57 (4): 559563 15Jankun J，Selman SH，Sw iercz R，et al . W . hy driving greeacan preventer .N ature，1997年；387(6633): 561 16Hu G，韓春，陳軍.綠茶抑制癌基因表達與(2)表沒食子兒茶素沒食子酸酯.癌癥，1995年；綠茶提取物抑制核

2、苷轉運并增強抗代謝物的抗腫瘤作用。臨床醫(yī)學雜志，1991年；6(1): 15 18杉山愛K，U eda H .茶對抗癌藥物順鉑所致鉑毒副作用的保護作用。國際地名協(xié)會的程序。史曉燕曾范迪安(同濟醫(yī)科大學臨床藥理研究所，武漢430030)茶多酚是茶葉的主要活性成分，是一種天然抗氧化劑。本文從清除自由基、抑制脂質過氧化、螯合金屬離子和增強其他抗氧化劑的作用等方面綜述了茶多酚的抗氧化作用。茶多酚；茶多酚；抗氧化活性；自由基茶是一種廣為接受的飲料，自古以來就享有保持健康的美譽。近年來，大量流行病學和實證研究證實，茶葉具有抗氧化、抗衰老、抗突變、抗癌、抗動脈粥樣硬化等多種生物學功能，其主要活性成分為茶多酚

3、。茶葉中含有30多種茶多酚，占凍干茶產(chǎn)品的25.5%，其中4種兒茶素主要是表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(心電圖)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGC)和表兒茶素沒食子酸酯(歐共體)，占茶多酚總量的60%。許多研究表明，茶多酚的抗腫瘤、抗衰老等多種生物活性與其抗氧化活性有關。與其他天然抗氧化劑相比，茶多酚具有很強的抗氧化作用，并涉及多種機制。1.直接清除活性氧自由基茶多酚富含酚羥基，能提供活性氫使自由基失活，而氧化形成的自由基由于含有兒茶酚結構而具有較高的穩(wěn)定性，因此茶多酚是供氫的自由基清除劑。以自由基清除劑2，2-氨基-2-雙(3，2-乙基-2-苯并噻唑-262

4、-磺酸)(ABTS)和自由基生成量ABTS為細胞內自由基含量指標，測定茶多酚對水相自由基的清除能力。結果表明，茶多酚能顯著降低自由基。心電圖和EGCG是最有效的單體，其活性順序為心電圖EGCG EGC EC。構效關系研究表明，它們的抗氧化活性與其分子結構有關。隨著酚羥基數(shù)量的增加，抗氧化活性增加。32-沒食子酸酯基團在清除自由基和穩(wěn)定半醌自由基中起重要作用。EGC在結構上類似于EC，除了在兒茶酚結構之外還有一個羥基。然而，心電圖和EGCG 32與沒食子酸的酯化增強了抗氧化活性1，2。采用黃嘌呤(x)和黃嘌呤氧化酶(XO)體691藥學外文版1998年版；25 (4)從1994年到2008年，中國

5、學術期刊電子出版社。保留所有權利。是產(chǎn)生氧氣的體外模型。用電子自旋共振技術或化學發(fā)光法觀察到茶多酚具有較強的清除o 2的能力。EGCG對O 2的最大去除率可達98%，約為維生素C的4倍。EGCG清除O 2的化學計量因子為5。98，也就是說，每分子EGCG可以捕獲6 O 2。斯科特，等5分鐘，用x？發(fā)現(xiàn)茶多酚以濃度依賴的方式抑制細胞色素C的還原。一些實驗表明，茶多酚能抑制XO活性。羥基自由基是最活躍、最有害的自由基。茶多酚能有效去除羥基3和5。芬頓反應生成羥基，二甲基亞砜與羥基反應生成甲磺酸。檢測甲基水楊酸并研究其清除羥自由基的活性。實驗表明，茶多酚具有很強的清除羥自由基的能力，比常用的羥自由基

6、清除劑強1 0 0倍以上。斯科特等人采用了氯化鐵？抗壞血酸系統(tǒng)產(chǎn)生羥自由基，羥自由基的含量通過脫氧核糖核酸損傷檢測。發(fā)現(xiàn)茶多酚能通過與羥基反應保護脫氧核糖核酸。單線態(tài)氧(1O2)也是一種非?；钴S的自由基。Tournaire等人通過動力學和近紅外單氧熒光方法發(fā)現(xiàn)茶多酚是有效的1O2捕集劑，其捕集能力主要歸因于其兒茶酚結構。過氧化物在二丙酸萘酯中熱分離產(chǎn)生1O2，導致質粒pbr322的DNA單鏈斷裂，兒茶素對其有明顯的保護作用，可顯著降低DNA損傷。此外，茶多酚還能抑制過氧化氫(H2O2)的形成。對H2O2和O2引起的細胞毒性也有保護作用。2.抑制脂質過氧化作用，體內產(chǎn)生的自由基容易攻擊細胞脂質中

7、的不飽和脂肪酸，形成脂質自由基，引起脂質過氧化。茶多酚不僅能清除鏈起始階段的羥自由基和氧自由基，還能破壞抗氧化劑鏈，清除脂質過氧化物自由基和烷氧基自由基，從而防止脂質自由基的繁殖和擴增。Afany等人體外誘導紅細胞膜過氧化。以脂質過氧化物的代謝產(chǎn)物丙二醛和脂溶性熒光產(chǎn)物為檢測指標，發(fā)現(xiàn)兒茶素能顯著降低脂質過氧化物的含量。茶多酚對降低低過氧化氫的保護作用也在許多實驗模型中得到證實，如硫酸亞鐵？抗壞血酸處理的大鼠腦微粒體和大鼠肝細胞膜：四氯化碳？抗壞血酸處理大鼠肝微粒體；茶多酚能以劑量依賴的方式抑制各種模型中左旋聚氧乙烯的產(chǎn)生。茶多酚對紫外線照射引起的脂質過氧化也有保護作用。Pelle等人用紫外輻

8、射測量了以硫代巴比妥酸反應物(TBAR)的增加和多不飽和脂肪酸底物(浦發(fā))的減少為指標的左旋磷酸的產(chǎn)生。結果發(fā)現(xiàn)，添加兒茶素的脂質體中左旋聚氧乙烯含量明顯低于對照組，且兒茶素的作用強于維生素E.Katiyar等人9還發(fā)現(xiàn)茶多酚能抑制光誘導的小鼠皮膚微粒體脂質過氧化。在整個實驗中，茶多酚能抑制四氯化碳誘導的小鼠肝臟脂質過氧化。N anjo等人10發(fā)現(xiàn)，高脂喂養(yǎng)的大鼠血漿維生素E濃度降低，而左旋磷酸酯酶水平升高，這可以通過茶多酚來逆轉。最近，人們發(fā)現(xiàn)茶多酚可以提高人體血漿的抗氧化能力，延緩內源性抗氧化劑2生育酚和2胡蘿卜素的消耗，抑制脂質過氧化。低密度脂蛋白的氧化修飾與心腦血管疾病的發(fā)生密切相關。

9、茶多酚能抑制低密度脂蛋白氧化，其作用強于VC和V E 12。10 nmolL兒茶素能顯著抑制紫外線誘導的低密度脂蛋白氧化，而100 nmol-1 ve僅表現(xiàn)出微弱的抑制作用。兒茶素還能有效阻斷低密度脂蛋白過氧化物引起的細胞毒性。超氧化物與一氧化氮反應產(chǎn)生的過氧化亞硝酸鹽是一種細胞毒素，也與脂質過氧化有關。茶多酚能減少過氧亞硝酸鹽引起的酪氨酸亞硝化，防止低密度脂蛋白表面電荷改變。實驗表明，EGCG可以抑制誘導型一氧化氮合酶基因的表達，阻斷轉錄因子B的激活，從而抑制一氧化氮合酶的轉錄，降低一氧化氮合酶蛋白及其活性，阻斷一氧化氮合成14。Salah等. 1為了研究茶多酚對脂質過氧化自由基的增殖和擴增

10、的影響791國外醫(yī)學藥學第25卷第4期1998年8月1994-2008中國學術期刊電子出版社。保留所有權利。在低密度脂蛋白氧化反應體系中，加入血紅蛋白鐵代替引發(fā)劑，使低水平的左旋聚氧乙烯自發(fā)擴散，并去除Cu2，消除茶多酚作為金屬螯合劑的可能性。結果表明，茶多酚能有效阻斷脂質過氧化物自由基的傳播，降低體內血管內皮細胞的消耗，不僅可以通過光、輻射、自由基等非酶反應產(chǎn)生，還可以通過酶反應產(chǎn)生。花生四烯酸代謝脂肪氧合酶途徑產(chǎn)生活性氧。52升Perival證明大豆脂肪氧合酶在結構和機制上與哺乳動物脂肪氧合酶相似，因此大豆脂肪氧合酶可以作為一種體外模型。研究表明，茶多酚能抑制大豆脂肪氧化酶的活性。3螯合金

11、屬離子過渡金屬鐵和銅是許多自由基生成過程的催化劑，尤其是Fe2。Fe2介導脂質過氧化，也是自由基如羥基自由基的介質。茶多酚中的兒茶酚結構可以螯合鐵離子，形成無活性的鐵絡合物，從而影響氧化過程。M orel等人15以鐵促進的L-PO和細胞內乳酸脫氫酶(LDH)的釋放為指標，研究了茶多酚對肝細胞的保護作用。發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)肝細胞中存在Fe2N TA(腈基三乙酸，使Fe3可溶)增加了丙二醛水平，增加了培養(yǎng)基中的乳酸脫氫酶，降低了細胞中乳酸脫氫酶的水平。兒茶素能以劑量依賴的方式降低丙二醛，阻止乳酸脫氫酶的釋放，降低細胞內Fe 3水平，并增加培養(yǎng)基中Fe3的濃度(從含鐵的肝細胞中去除Fe3)。其螯合鐵的能力與其

12、保護作用有很好的相關性，證明其保護作用與鐵螯合有關。郭等2研究了茶多酚對鐵誘導的突觸體脂質過氧化的保護作用，并以抑制產(chǎn)生和清除自由基為指標，比較了4種主要兒茶素的作用。發(fā)現(xiàn)它們對Fe2有害嗎？Fe3刺激突觸體脂質過氧化產(chǎn)生的TBAR效應對EGCG心電圖的抑制作用：該系統(tǒng)產(chǎn)生的脂質自由基清除活性為EGCG EGC心電圖。對其機理的研究表明，茶多酚的抗氧化活性不僅取決于其清除羥自由基和脂質自由基的能力，還取決于其螯合鐵離子的能力，即EGC心電圖=EGCG EC。細胞內抗氧化防御系統(tǒng)的激活細胞內有一個抗氧化防御系統(tǒng)，能及時清除體內多余的自由基，維持自由基的動態(tài)平衡。細胞內抗氧化防御系統(tǒng)主要包括抗氧化

13、酶和一些低分子化合物。低分子化合物如抗壞血酸、維生素E和谷胱甘肽能及時阻止自由基鏈式反應，抑制自由基的產(chǎn)生。例如，維生素E可以清除1O 2和O 2，阻止脂質過氧化。茶多酚能減少血管內皮細胞自由基，再生細胞內血管內皮細胞，減少血管內皮細胞的消耗。茶多酚在谷胱甘肽過氧化物酶(GSH2Px)的作用下，能增強谷胱甘肽還原酶(GSH2r)活性，還原氧化的谷胱甘肽，去除H2O2和有機氫過氧化物。細胞中主要的抗氧化酶是超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶和谷胱甘肽硫轉移酶。谷胱甘肽過氧化物酶能及時去除過氧化氫和過氧化氫，減少羥基的形成；鈣能清除紅細胞、過氧化物酶體和線粒體中的過氧化氫。超氧化物歧化

14、酶能清除氧氣，減少羥基生成。谷胱甘肽硫轉移酶可以減少脂質氫過氧化物。兒茶素能明顯提高淋巴細胞超氧化物歧化酶的表達和紅細胞及淋巴細胞超氧化物歧化酶的活性。對于酒精性肝硬化患者超氧化物歧化酶表達和活性的降低，兒茶素可以明顯增加。茶多酚對SKH21裸鼠小腸、肝和肺谷胱甘肽過氧化物酶、鈣離子和谷胱甘肽硫轉移酶活性有明顯的增強作用。對肺、小腸和皮膚中谷胱甘肽H2R酶活性的影響無統(tǒng)計學意義，表明谷胱甘肽過氧化物酶和其他酶活性的增加不是由于氧刺激。紫外線照射SKH21裸鼠可導致皮膚抗氧化防御系統(tǒng)衰竭，而茶多酚可明顯逆轉這一現(xiàn)象?？傊?，茶多酚不僅具有很強的直接清除自由基的能力，而且還能通過金屬螯合作用提高其他抗氧化劑的產(chǎn)量。25(4)1994-2008，中國學術期刊電子出版社。保留所有權利。利用其他機制發(fā)揮抗氧化作用。最近的研究表明，氧化損傷與許多疾病密切相關，如衰老、腫瘤、動脈粥樣硬化、心血管疾病、輻射損傷、炎癥、自身免疫性疾病等。茶多酚

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