摘要： 本發(fā)明提供了一種荷葉提取物工藝及其質量控制方法和應用，所述荷葉提取物制備方法為：取荷葉，除雜質，切碎，加水煎煮1?3次，每次0.5?2小時，每次料液比為1：5?20，過濾，合并濾液，濃縮至稠膏狀，干燥得荷葉提取物。該制備方法僅采用水提取，制備方法簡單，安全，所得提取物更健康且成分豐富，可方便地作為原料制作藥物、保健品、食品等產(chǎn)品使用。所述質量控制方法，采用總生物堿含量檢測、荷葉堿含量檢測、UPLC?Q?TOF?MS分析等多種檢測手段、方法，能夠對荷葉提取物的成分進行全面質量控制。

主分類號：

A61K36/62(2006.01)(含有來自藻類、苔蘚、真菌或植物或其派生物，例如傳統(tǒng)草藥的未確定結構的藥物制劑)

權利要求：

1.一種荷葉提取物制備方法，其特征在于包括： 取荷葉，除雜質，切碎，加水煎煮1-3次，每次0.5-2小時，每次料液比為1：5-20，過濾，合并濾液，濃縮至稠膏狀，干燥，得荷葉提取物。 2.根據(jù)權利要求1所述的荷葉提取物制備方法，其特征在于： 所述加水煎煮的次數(shù)為3次，每次1小時，各次的料液比分別為1：15、1：10、1：10。 3.根據(jù)權利要求1所述的荷葉提取物制備方法，其特征在于： 所述荷葉提取物的成分包括荷葉堿、降荷葉堿、蓮心季銨堿、槲皮素、山奈酚、異鼠李素、糖類、氨基酸、原花青素。 4.根據(jù)權利要求1到3中任一項所述的荷葉提取物制備方法，其特征在于進一步包括對所述荷葉提取物進行如下檢測： (1)總生物堿含量檢測； (2)荷葉堿含量檢測； (3)總黃酮含量檢測； (4)UPLC-Q-TOF-MS檢測， 其中，所述總生物堿含量檢測包括以下步驟： 試劑配制：配制pH5.0溴甲酚綠溶液； 對照品溶液制備：取荷葉堿對照品，加氯仿配制成對照品溶液； 供試品溶液的制備：取荷葉提取物，加溶劑，提取，固液分離，取液體，即為供試品溶液； 標準曲線的繪制：取不同量的荷葉堿對照品溶液4份，分別加入試劑配制成溶液，測定吸光度，繪制標準曲線； 樣品含量的測定：取供試品溶液測定吸光度，帶入標準曲線計算含量， 總生物堿含量檢測包括： 供試品溶液的制備：所述溶劑為75％乙醇，固液分離方法為于50℃下超聲提取， 所述荷葉堿含量檢測包括以下步驟： 對照品溶液制備：取荷葉堿對照品，加溶劑制成對照品溶液； 供試品溶液制備：取荷葉提取物，加溶劑，提取，固液分離，制備程供試品溶液； 色譜條件：照高效液相色譜法測定，采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以乙腈：水：三乙胺：冰醋酸為流動相進行等度洗脫； 測定：取對照品溶液、供試品溶液,分別注入色譜儀，按外標法測定含量， 所述荷葉堿含量檢測包括： 對照品溶液制備具體過程，包括：取荷葉堿對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含15μg的溶液； 供試品溶液制備具體過程，包括：取荷葉提取物干粉0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，超聲30min后冷卻至室溫，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取濾液5mL置25mL容量瓶中，加水至刻度線，搖勻； 色譜條件，包括：檢測波長為270nm，流速為1.0mL/min，流動相為乙腈：水：三乙胺：冰醋酸＝27:70.6:1.6:0.78， 所述UPLC-Q-TOF-MS檢測包括以下步驟： 供試品溶液制備，包括：稱取一定量荷葉提取物，用50％甲醇水溶解并稀釋至合適濃度，過濾,取濾液； 設定液相色譜條件，包括：采用Waters BEH C18色譜柱，柱溫30℃，流速0.2ml/min,以0.1％甲酸水為流動相A，以乙腈為流動相B，按下表進行梯度洗脫：時間(min)流速(mL/min)A(％)B(％)0.000.20098.02.05.000.20098.02.015.000.20060.040.020.000.2000.0100.021.000.2000.0100.022.000.20098.02.025.000.20098.02.0檢測，包括：取供試品溶液,注入UPLC-Q-TOF-MS儀，進行測定， 其中設定質譜條件為：ESI離子源，分別在負、正離子模式下采集數(shù)據(jù)，掃描分子量范圍：50-1500Da，碰撞氣為氬氣，碰撞能為20-40V，毛細管電壓為(-)2.5kV和(+)3.0kV，錐孔電壓為40V，源溫為120℃，霧化氣為氮氣，脫溶劑氣為氮氣，脫溶劑氣溫度為400℃，錐孔氣流量為50L/h，脫溶劑氣流量為700L/min。 5.根據(jù)權利要求4所述的荷葉提取物制備方法，其特征在于進一步包括對所述荷葉提取物進行如下檢測中的至少一種： (5)水分含量檢測； (6)總糖含量檢測； (7)葡萄糖+果糖+蔗糖含量檢測； (8)槲皮素+山奈酚+異鼠李素含量檢測； (9)灰分含量檢測； (10)氨基酸含量檢測； (11)原花青素含量檢測。 6.根據(jù)權利要求1至5中的任一項所述的荷葉提取物。 7.根據(jù)權利要求6所述的荷葉提取物在制作產(chǎn)品中的用途，所述產(chǎn)品是食品、保健品和藥品中的一種。

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