術(shù)中快速病理，也稱術(shù)中冰凍，是手術(shù)室與病理科的冰雪奇緣。

術(shù)中快速

有啥用？

同一個(gè)器官的不同疾病，即使都要進(jìn)行手術(shù)，手術(shù)的范圍也是不一樣的。只有當(dāng)患者確診為癌癥時(shí)，外科醫(yī)生才能實(shí)施相應(yīng)的「癌癥手術(shù)」。

之前我們?cè)?jīng)講過(guò)，癌癥確診需要病理檢查，也就是在腫瘤上取一點(diǎn)樣本，放在顯微鏡下觀察。

為了取這些樣本，醫(yī)生們想了各種辦法，既要將身體損害降到最低，又要將醫(yī)療器械探入體內(nèi)取樣。我們熟悉的胃鏡就是其中之一。

胃鏡概念圖

但是……

不是所有病變都能通過(guò)內(nèi)鏡、穿刺這樣的手段取出來(lái)檢查。這時(shí)候怎么才能確定是不是要進(jìn)行「癌癥手術(shù)」呢？

我們還曾經(jīng)講過(guò)，手術(shù)室切下來(lái)的病變，也會(huì)送到病理科進(jìn)行病理檢查。其中有一項(xiàng)檢查內(nèi)容，就是病變到底有沒(méi)有「切干凈」（詳情請(qǐng)點(diǎn)擊：探秘病理科：我從手術(shù)室切下來(lái)的肉，你們拿去做了什么？）。

但是……

手術(shù)都做完了，就算知道「沒(méi)切干凈」，豈不是只能亡羊補(bǔ)牢了？為什么不能手術(shù)期間就檢查一下切緣呢？

術(shù)中快速冰凍，就是解決這些問(wèn)題的一項(xiàng)檢查。聽(tīng)名字就知道，它的特點(diǎn)就是「快」。

有多快呢？通?？梢栽?30 分鐘內(nèi)給出檢查結(jié)果。

有了這項(xiàng)技術(shù)，手術(shù)前無(wú)法確定手術(shù)范圍的患者，可以先進(jìn)行手術(shù)，在手術(shù)室取出樣本送到病理科，在手術(shù)室等待 30 分鐘得到結(jié)果后，當(dāng)場(chǎng)決定手術(shù)范圍。

需要在手術(shù)中確定是否切干凈的患者，也可以在手術(shù)間等待 30 分鐘，假如真的沒(méi)有「切干凈」，還可以繼續(xù)手術(shù)擴(kuò)大切除范圍。

可以說(shuō)這 30 分鐘，是世界上最漫長(zhǎng)的 30 分鐘了。在這 30 分鐘內(nèi)具體發(fā)生了些什么呢？

電視劇里術(shù)中快速冰凍檢查的過(guò)程（來(lái)自日劇《Fragile》）

是不是看花眼了？我們來(lái)分解步驟。

術(shù)中快速

咋弄的？

手術(shù)室切下的人體組織送到病理科，依然需要先「取材」。為了保證速度，通常一處檢查部位只取 1~2 塊標(biāo)本。

既然叫術(shù)中快速冰凍，那除了「快」，就是「冷」了。

以前我們也講過(guò)，想把人體組織切成幾微米厚的薄片，直接切軟趴趴的肉是不行的。

就算切涮羊肉片，也得先凍一凍再切不是？

也不知道是不是受了中國(guó)涮羊肉的啟發(fā)，總之呢，一百多年前，西洋人發(fā)明了用于病理檢查的冰凍切片技術(shù)。

冰凍切片和石蠟切片一樣，要想切，先得制成「塊」。

切羊肉片也要先制成“羊肉塊”。圖源網(wǎng)絡(luò)。

不管是石蠟切片還是冰凍切片，「制成塊」這個(gè)步驟，主要靠的就是「包埋」。

石蠟切片是用石蠟制成「蠟塊」，冰凍切片是用水制「冰塊」嗎？

還真不是。冰凍切片反而不能碰水，水在冷凍時(shí)形成的冰晶，會(huì)十分影響切片的質(zhì)量，對(duì)細(xì)胞和組織的形態(tài)產(chǎn)生破壞，極大地干擾病理醫(yī)師的診斷。

真要說(shuō)起來(lái)，冰凍切片的「冰塊」，外形有點(diǎn)像「雪糕」。再說(shuō)了，「雪糕」也應(yīng)該比「冰塊」好切??！

冰凍切片所用的包埋劑，通常使用OCT包埋劑，是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，長(zhǎng)得有點(diǎn)像膠水。特點(diǎn)就是好凍，好切，溶于水。

這種膠水可不便宜。

上圖就是OCT包埋劑涂到組織托盤表面，放入冰凍切片機(jī)后，迅速冷凍的過(guò)程。

速度快得像被愛(ài)莎施了魔法。

要問(wèn)切片機(jī)里溫度是有多低，這可是門學(xué)問(wèn)，不同組織需要的溫度是不一樣的。不過(guò)大致倒也沒(méi)多低，反正不如東北最冷的時(shí)候冷（最多打個(gè)平手？）。

如果直接在冰凍切片機(jī)里涂這種「膠水」，效果是醬嬸兒的：

這里涂完以后還放上了需要制片的組織

速凍完成以后，就要切片和貼片了。貼片就是把切好的薄薄一層組織，貼到玻璃片（載玻片）上。

這需要經(jīng)驗(yàn)豐富的病理技術(shù)員完成。

具體是怎么做的？憋說(shuō)話，看圖：

切片和貼片

貼好的切片需要立刻放入固定液里固定，時(shí)間通常不超過(guò)1分鐘。

這時(shí)，載玻片上的組織切片幾乎是透明的，想在顯微鏡下看清楚，需要染上色。染色方法與常規(guī)石蠟切片大致上相同，都是HE染色。

染色完成后，滴加樹(shù)脂膠用蓋玻片覆蓋，就是呈現(xiàn)在病理醫(yī)師面前的冰凍切片了。

聽(tīng)起來(lái)很復(fù)雜，實(shí)際上這個(gè)過(guò)程只需要 10 分鐘左右的時(shí)間。

術(shù)中快速

萬(wàn)能嗎？

有了這么酷的技術(shù)，我們還要石蠟切片干啥？都去做冰凍好了呀！

很遺憾，并不能。術(shù)中冰凍僅僅是一個(gè)粗略的判斷，遠(yuǎn)遠(yuǎn)無(wú)法代替慢工出細(xì)活的石蠟切片。

前面我們提到過(guò)，為了保證速度，一處檢查部位通常只取 1~2 塊標(biāo)本制片。但是很多腫瘤有一種叫做「異質(zhì)性」的特點(diǎn)。說(shuō)白了就是同一塊腫瘤，不同的區(qū)域長(zhǎng)得還有可能不一樣。

當(dāng)然了，除了有可能長(zhǎng)得不一樣，還有很多其它不一樣的地方，我們?cè)谶@先不做討論。

那么問(wèn)題來(lái)了，醫(yī)生只能盡量選擇從外表看起來(lái)最具有代表性的區(qū)域進(jìn)行制片，但仍然有時(shí)取不到最典型的區(qū)域。

那我不圖你 30 分鐘出結(jié)果，我等倆小時(shí)，你多取一些，我慢慢等總可以了？總比石蠟切片等好幾天強(qiáng)啊！

很遺憾，冰凍切片的制作方式較為簡(jiǎn)略，還會(huì)導(dǎo)致鏡下形態(tài)存在一些假象。術(shù)中快速冰凍的診斷，也需要更高素質(zhì)的病理醫(yī)師。

我們前面說(shuō)過(guò)，水在冷凍時(shí)形成的冰晶會(huì)影響診斷，所以不能用水進(jìn)行包埋。但是有些人體組織本身就含有大量水分，在進(jìn)行冰凍切片診斷時(shí)就會(huì)受到限制。

冰晶形成

冰凍切片還可能會(huì)造成組織過(guò)度收縮，給診斷造成困難。冰凍處理后的細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)體積脹大、拉長(zhǎng)、細(xì)胞內(nèi)空泡等變化，細(xì)胞核也會(huì)產(chǎn)生一定的變形。

還有很多疑難病例，即使是石蠟切片都極難確切診斷，僅憑冰凍切片更無(wú)法診斷明確。況且我們之前介紹的免疫組化技術(shù)，尚未廣泛應(yīng)用于冰凍切片。

國(guó)內(nèi)外報(bào)道的術(shù)中冰凍診斷準(zhǔn)確率在 97% 左右，是存在一定風(fēng)險(xiǎn)的，而且不能完全避免。

還有一點(diǎn)就是，由于成本較高，冰凍切片較常規(guī)石蠟切片的單價(jià)更昂貴，對(duì)于需要制作大量切片的惡性腫瘤患者來(lái)說(shuō)，會(huì)造成更大的經(jīng)濟(jì)壓力。

權(quán)衡利弊

怎么辦？

術(shù)中快速冰凍的局限無(wú)法避免，然而對(duì)于一些患者手術(shù)范圍的選擇起到?jīng)Q定性作用。

于是對(duì)于需要做術(shù)中冰凍診斷的患者，通常采取這樣的方式：

對(duì)于送檢的快速冰凍標(biāo)本，醫(yī)生取所需檢查的 1~2 塊組織進(jìn)行冰凍切片。

另取更多的病變組織，制作蠟塊進(jìn)行石蠟切片。

對(duì)于冰凍后的那 1~2 塊組織，切片診斷后也會(huì)制作成蠟塊，其切片稱為「冰凍剩余」切片。

手術(shù)中，病理醫(yī)師對(duì)冰凍切片進(jìn)行大致診斷，手術(shù)醫(yī)生根據(jù)這個(gè)診斷做出手術(shù)方案的選擇。

手術(shù)后，用幾天時(shí)間對(duì)石蠟切片和冰凍剩余切片進(jìn)行細(xì)致觀察，復(fù)核術(shù)中診斷，并且做出更細(xì)致的診斷。

快速冰凍往往止步于判斷手術(shù)方式，而這個(gè)更細(xì)致的診斷往往可以得到更多的信息，比如判斷患者的預(yù)后，指導(dǎo)術(shù)后的輔助治療等等。

還有一些通過(guò)冰凍切片無(wú)法做出診斷的病例，更要等待術(shù)后的石蠟切片才能決定下一步是否還需要二次手術(shù)。雖然二次手術(shù)會(huì)造成一定的負(fù)面影響，但是術(shù)中冰凍也并非萬(wàn)能，這一點(diǎn)是一定要清楚的。

總結(jié)起來(lái)就是這樣：

好了，以上就是關(guān)于術(shù)中快速冰凍診斷技術(shù)的全部介紹。

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