藥食兩用獼猴桃果實(shí)中脂肪和蛋白質(zhì)含量分析.doc
藥食兩用獼猴桃果實(shí)中脂肪和蛋白質(zhì)含量分析
藥食兩用獼猴桃果實(shí)中脂肪和蛋白質(zhì)含量分析 摘要:本論文測(cè)定獼猴桃果實(shí)中脂肪和蛋白質(zhì)含量 ,并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行研究。分別利用雙縮尿分光光度法、索氏提取法來對(duì)獼猴桃果實(shí)中蛋白質(zhì)、脂肪含量進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:獼猴桃果實(shí)中蛋白質(zhì)2.27?,脂肪是20.09?。所以研究和開發(fā)獼猴桃中蛋白質(zhì)、粗脂肪等成分很有經(jīng)濟(jì)和實(shí)踐的意義。 關(guān)鍵詞:獼猴桃蛋白質(zhì)脂肪; 引言 獼猴桃(Actinidiachinensis)是一種藤本植物,是我國(guó)特產(chǎn)水果之一。獼猴桃具有很高營(yíng)養(yǎng)、醫(yī)療、保健和觀賞價(jià)值,被譽(yù)為“水果之王”,是目前世界各國(guó)競(jìng)相發(fā)展的果品之一[1]。 目前,世界上消費(fèi)量最大的前26種水果中,獼猴桃營(yíng)養(yǎng)最為豐富全面,它含有17種氨基酸,極豐富的維生素C,蛋白質(zhì)、脂肪、糖等,還含有胡蘿卜素等。其維生素C的含量比蘋果、梨等水果超出幾十倍,是一種“超級(jí)水果”[2] 。 獼猴桃有相當(dāng)滿意??抗癌作用,能阻斷致癌物質(zhì)亞硝胺的合成,其阻斷率高達(dá)98%。用獼猴桃汁、已破壞維生素C 的獼猴桃汁、檸檬汁和已破壞維生素C的檸檬汁,做觀察阻斷致癌物質(zhì)亞硝胺的合成效力的實(shí)驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn),獼猴桃所含抗癌活性物質(zhì)多于檸檬4倍左右[3]。 蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ),脂肪供給人體熱量、構(gòu)成身體組織和生物活性物質(zhì)。本文為更好的開發(fā)和利用獼猴桃提供初步科學(xué)依據(jù),將分別利用雙縮尿分光光法,索氏提取法來對(duì)獼猴桃中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪含量進(jìn)行測(cè)定[5]。 1.實(shí)驗(yàn)部分 1.1儀器與試劑 1.1.1 儀器 UV-4802-型紫外可見分光光度計(jì)(尤尼克(上海)儀器有限公司),BS224S系列電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司),索氏提取器。 1.1.2試劑 牛血清蛋白(上海藍(lán)季科枝發(fā)展公司),硫酸銅(AR),石油醚(AR),酒石酸鉀鈉,氫氧化鈉,濃硝酸,茚三酮(AR),硝酸銀(AR)。 雙縮脲試劑:稱取硫酸銅和酒石酸鉀鈉溶于蒸餾水中,邊攪拌邊加入氫氧化鈉溶液,用水稀釋至1000mL。 1.1.3樣品來源 獼猴桃:(喀什市億家超市買的)。 1.2實(shí)驗(yàn)方法 1.2.1 蛋白質(zhì)的定性分析 稱取樣品適量,用蒸餾水浸泡12h,間隔時(shí)間搖動(dòng)完全容去蛋白質(zhì),然后過濾,把濾液保存?zhèn)溆谩? 取三支試管各盛2mL樣品溶液,分別加入茚三酮溶液,濃硝酸,硝酸銀溶液進(jìn)行定性分析[4]。 1.2.2蛋白質(zhì)的定量分析―雙縮脲法 1.雙縮脲法的原理:蛋白質(zhì)的肽鍵與堿性銅鹽絡(luò)和生成紫紅色復(fù)合物,蛋白質(zhì)含量不同,產(chǎn)生顏色的深淺也不一樣,故可用比色法進(jìn)行測(cè)定其靈敏度較低。用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液(牛血清蛋白)作為對(duì)照品[6]。 2.對(duì)照品溶液的制備:精稱取結(jié)晶牛血清蛋白1g ,置100mL 容量瓶中加蒸餾水振蕩溶解,并稀釋到刻度,制備10 mg.mL-1的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。 3.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取12支試管分兩組,分別加入(10mg.mL-1)0,0.2,0.4,0.6,0.8, 1.0mL標(biāo)準(zhǔn)牛血清蛋白溶液,用水補(bǔ)足到1mL,各分別加入雙縮脲試劑4mL,混合均勻,振蕩15min,室溫放置30min,然后用分光光度計(jì)測(cè)得波長(zhǎng)λ540nm的吸光度A。用未加蛋白質(zhì)溶液的第一支試管作為空白對(duì)照液,取兩組測(cè)定的平均值,以蛋白質(zhì)的含量為橫坐標(biāo),以吸光度A為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 4.測(cè)定獼猴桃中蛋白質(zhì)含量:取獼猴桃處理液,加入雙縮尿試劑4.0mL,按繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線條件下進(jìn)行操作,然后用分光光度計(jì)測(cè)得λ540nm的吸光度(A)。 按下計(jì)算公式來計(jì)算樣品中的蛋白質(zhì)含量: 蛋白質(zhì)含量(?)=C×V/W×100? 式中:C―用回歸方程求得的待測(cè)樣品的濃度(mg.mL-1); V―樣品溶液的總體積(mL); W―樣品的質(zhì)量(g); 1.2.3加樣回收率的測(cè)定 精密吸取1mL樣品液分別置于5個(gè)10mL的容量瓶中,分別加入精密吸取0.3mL,0.45mL,0.55mL,0.6mL,0.65mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,加水補(bǔ)足2mL, 按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下方法測(cè)定。 1.2.4粗脂肪含量的測(cè)定―索氏提取法 1.索氏提取法的原理:本法利用石油醚在索氏提取器中提取樣品中的脂肪,然后蒸發(fā)除去石油醚,干燥,稱重,即可得到樣品中粗脂肪的百分含量[7]。 2.樣品處理:將獼猴桃樣品,放在80-100℃烘箱中烘4個(gè)小時(shí)。泠卻后,準(zhǔn)確地稱取30g,置于研缽中研磨細(xì),研缽的樣品及擦凈研缽的脫脂棉一并用脫脂濾紙包住用絲線扎讓樣出。用特制的濾紙樣品后,接口用脫脂棉塞好。放入索氏提取器的提取管內(nèi),最后再用石油醚洗凈研缽后倒入提取管內(nèi)。 3.測(cè)定獼猴桃中粗脂肪的含量:洗凈索氏提取瓶,在1
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