本發(fā)明屬于生物技術(shù)和食品科學(xué)領(lǐng)域，涉及一種番石榴幼果提取物的制備方法及其產(chǎn)品和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、番石榴(psidium guajaval.)是桃金娘科(myrtaceae)番石榴屬(psidium)的常綠灌木或小喬木，原產(chǎn)于南美洲熱帶地區(qū)，目前在我國南部廣東、廣西、福建、云南等廣泛分布。近年來的研究表明，番石榴具有降糖、降壓、抗病毒等多種生理作用。番石榴的未成熟幼果及葉已被收錄于廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)(第一冊)，主要功效包括澀腸止瀉、收斂止血，用于治療泄瀉、下痢不止；而其幼果具有降血糖作用。

2、盡管番石榴成熟果實(shí)和葉片的研究相對充分，但對于其幼果的研究仍然非常有限。番石榴幼果通常在種植過程中被視為副產(chǎn)品，然而，相對于成熟果實(shí)，幼果顯示出更強(qiáng)的生物活性和更高的藥用價(jià)值。因此，開發(fā)針對番石榴幼果的特定提取技術(shù)顯得尤為重要。

3、目前常用的番石榴提取技術(shù)包括水煎法、有機(jī)溶劑提取和發(fā)酵提取。水煎法雖然操作簡單，但提取效率低，耗能高，且長時(shí)間高溫處理可能導(dǎo)致活性成分損失。有機(jī)溶劑提取雖然提取效率較高，但使用大量有機(jī)溶劑增加了成本并帶來潛在環(huán)境污染，殘留的有機(jī)溶劑也可能影響產(chǎn)品安全性，限制其在食品和保健品中的應(yīng)用。發(fā)酵提取雖具有一定優(yōu)勢，但需要特定的高活性菌種，生產(chǎn)過程易受環(huán)境變化影響，控制難度大，增加了成本和復(fù)雜性。

4、因此，研發(fā)一種低能耗、過程簡潔、環(huán)保且高效的新型提取方法對于實(shí)現(xiàn)番石榴幼果的工業(yè)化生產(chǎn)和充分利用具有重要意義。這種新方法應(yīng)能充分的有效提取并保留更多的活性成分，同時(shí)減少能源消耗和環(huán)境影響，滿足現(xiàn)代食品和保健食品行業(yè)的高標(biāo)準(zhǔn)，簡化操作過程，并確保提取物的質(zhì)量穩(wěn)定性，易于規(guī)?；a(chǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、鑒于現(xiàn)有技術(shù)的局限性，本發(fā)明的目的在于提供一種番石榴幼果提取物的制備方法及其產(chǎn)品和應(yīng)用。

2、為達(dá)到此發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

3、第一方面，本發(fā)明提供一種番石榴幼果提取物的制備方法，所述制備方法包括：

4、(1)將番石榴幼果粉碎，與水混合后進(jìn)行微射流提取，得到第一混合物；

5、(2)將第一混合物與復(fù)合酶混合酶解，保溫，得到第二混合物；

6、(3)將第二混合物經(jīng)陶瓷膜過濾，減壓濃縮，滅菌，干燥，即得。

7、本發(fā)明通過結(jié)合現(xiàn)代生物技術(shù)和物理處理技術(shù)，克服了傳統(tǒng)單一工藝在原料得率低、營養(yǎng)成分流失嚴(yán)重及成分復(fù)雜化等方面的不足。所采用的制備方法不僅簡便、高效，具備可持續(xù)性，適合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)，并且顯著提高了原料得率和提取效率，降低了生產(chǎn)成本。同時(shí)，此方法能夠有效保留和提高活性物質(zhì)如番石榴多酚和多糖，增強(qiáng)了生物活性。所得提取物展現(xiàn)出優(yōu)異的抗氧化、抗炎、抗衰老和抗糖化效果，為食品和保健品行業(yè)提供了高營養(yǎng)價(jià)值的成分。此外，本發(fā)明的方法在生產(chǎn)過程中不使用有機(jī)溶劑，確保了環(huán)保和低能耗，是一種可持續(xù)的解決方案。

8、優(yōu)選地，番石榴幼果粉碎后還包括過篩。

9、優(yōu)選地，所述微射流提取的溫度為30-60℃，次數(shù)為1-6次。

10、所述溫度可以選擇30℃、32℃、35℃、38℃、40℃、42℃、45℃、48℃、50℃、52℃、55℃、58℃、60℃等，次數(shù)可以選擇1次、2次、3次、4次、5次、6次等，上述數(shù)值范圍內(nèi)其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

11、所述微射流提取的壓力為100-250mpa，料液質(zhì)量比為1:(10-40)。

12、所述壓力可以選擇100mpa、110mpa、120mpa、130mpa、140mpa、150mpa、160mpa、170mpa、180mpa、190mpa、200mpa、210mpa、220mpa、230mpa、240mpa、250mpa等，(10-40)中的具體點(diǎn)值均可選擇10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40等，上述數(shù)值范圍內(nèi)其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

13、優(yōu)選地，所述復(fù)合酶為中性蛋白酶、木聚糖酶、果膠酶和單寧酶的組合。

14、本發(fā)明創(chuàng)造性地發(fā)現(xiàn)中性蛋白酶、木聚糖酶、果膠酶和單寧酶的組合在酶解效果上具有一定的協(xié)同效果。

15、優(yōu)選地，所述中性蛋白酶、木聚糖酶、果膠酶和單寧酶的質(zhì)量比為(2-3):(2-3):(1-2):(1-2)。

16、其中(2-3)中的具體點(diǎn)值均可選擇2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3等，(1-2)中的具體點(diǎn)值均可選擇1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2等，上述數(shù)值范圍內(nèi)其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

17、優(yōu)選地，所述復(fù)合酶的質(zhì)量為番石榴幼果質(zhì)量的2-3％(例如2％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3％等)，酶解的溫度為40-50℃(例如40℃、41℃、42℃、43℃、44℃、45℃、46℃、47℃、48℃、49℃、50℃等)，時(shí)間為30-40min(例如30min、31min、32min、33min、34min、35min、36min、37min、38min、39min、40min等)。

18、上述數(shù)值范圍內(nèi)其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

19、優(yōu)選地，所述保溫的壓力為0.1-0.2mpa，溫度為120-130℃，時(shí)間為10-20min。

20、所述壓力可以選擇0.1mpa、0.11mpa、0.12mpa、0.13mpa、0.14mpa、0.15mpa、0.16mpa、0.17mpa、0.18mpa、0.19mpa、0.2mpa等，溫度可以選擇120℃、121℃、122℃、123℃、124℃、125℃、126℃、127℃、128℃、129℃、130℃等，時(shí)間可以選擇10min、11min、12min、13min、14min、15min、16min、17min、18min、19min、20min等，上述數(shù)值范圍內(nèi)其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

21、優(yōu)選地，所述陶瓷膜的孔徑為100-220nm，第二混合物經(jīng)陶瓷膜過濾時(shí)的溫度為30-40℃。

22、所述陶瓷膜的孔徑可以選擇100nm、120nm、140nm、160nm、180nm、200nm、220nm等，溫度可以選擇30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃等，上述數(shù)值范圍內(nèi)其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

23、第二方面，本發(fā)明提供一種根據(jù)第一方面所述的番石榴幼果提取物的制備方法制備得到的番石榴幼果提取物。

24、第三方面，本發(fā)明提供一種根據(jù)第二方面所述的番石榴幼果提取物在制備具有抗炎、抗衰、抗糖化的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

25、優(yōu)選地，所述產(chǎn)品包括食品、保健品或化妝品。

26、優(yōu)選地，所述產(chǎn)品的劑型包括粉劑、顆粒劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、軟糖劑、溶液劑、果凍劑、乳劑。

27、優(yōu)選地，所述化妝品包括面膜、面霜、精華、乳液、爽膚水或彩妝。

28、優(yōu)選地，所述番石榴幼果提取物在產(chǎn)品中的添加量為0.2-20％，例如0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、2％、3％、5％、8％、10％、12％、15％、18％、20％等，上述數(shù)值范圍內(nèi)其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

29、優(yōu)選地，所述產(chǎn)品中還包括輔料和/或添加劑。

30、相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有以下有益效果：

31、(1)本發(fā)明首次結(jié)合微射流酶解、短時(shí)高溫高壓處理和膜過濾技術(shù)，成功獲得一種番石榴幼果提取物。

32、(2)本發(fā)明的制備方法顯著提高了成品得率，干燥后提取物的得率超過35％。多酚含量超過5％，多糖含量超過13％，顯示出較高的營養(yǎng)價(jià)值。

33、(3)本發(fā)明在特定溫度和膜孔徑條件下處理后，番石榴幼果提取物的抗氧化、抗炎、抗衰老和抗糖化生物活性顯著提高。

34、(4)本發(fā)明的制備方法所得的提取物清除dpph自由基的ic50值小于70μg/ml，并能顯著抑制膠原蛋白酶和透明質(zhì)酸酶活性，抑制ages生成。

35、(5)本發(fā)明的制備方法所得的提取物能同時(shí)顯著抑制巨噬細(xì)胞no分泌和tnf-α、il-6的表達(dá)，減少hacat細(xì)胞內(nèi)活性氧ros水平。并能顯著提高斑馬魚膠原蛋白含量，且在斑馬魚皮膚炎癥模型中顯著抑制中性粒細(xì)胞聚集。

36、(6)本發(fā)明的制備方法所得的提取物，具有強(qiáng)抗氧化、抗炎、抗衰和抗糖化活性，可作為天然活性成分應(yīng)用于大健康產(chǎn)品中。

37、(7)本發(fā)明的制備方法所得的提取物干粉具有良好的流動(dòng)性，5％濃度水溶液ntu值低于10，澄清度高，性狀穩(wěn)定，無肉眼可見的沉淀或絮狀物，適用于多種制劑類型，包括粉劑、顆粒劑、液體制劑等。

38、(8)本發(fā)明結(jié)合現(xiàn)代生物技術(shù)和物理處理技術(shù)，全程不使用有機(jī)試劑，不僅提升了番石榴幼果提取物的提取效率和生物活性，還擴(kuò)展了其在大健康產(chǎn)品中的應(yīng)用范圍，具有顯著的市場潛力和應(yīng)用價(jià)值。且方法連貫性強(qiáng)，提取時(shí)間短，節(jié)能環(huán)保，操作簡便，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。

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