本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物或原料加工領(lǐng)域，具體涉及一種茶多酚提取方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

茶多酚(teapolyphenols)是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱，包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等。主要為黃烷醇(兒茶素)類，兒茶素占60-80％。兒茶素類主要由egc、dlc、ec、egcg、gcg、ecg等幾種單體組成。類物質(zhì)茶多酚又稱茶鞣或茶單寧，是形成茶葉色香味的主要成份之一，也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。研究表明，茶多酚等活性物質(zhì)具解毒和抗輻射作用，能有效地阻止放射性物質(zhì)侵入骨髓，并可使鍶90和鈷60迅速排出體外，被健康及醫(yī)學(xué)界譽為“輻射克星”。據(jù)相關(guān)資料顯示，茶葉中的茶多酚(主要是兒茶素類化合物)有以下功能：

1、防治心血管疾病降血脂、預(yù)防肝臟及冠狀動脈粥樣硬化；

2、提高免疫能力；

3、抗脂質(zhì)過氧化，預(yù)防衰老；

4、對重金屬鹽和生物堿中毒的抗解作用；

5、防輻射損傷，減輕放療的不良反應(yīng)；

6、防齲固齒和清除口臭的作用；

7、助消化作用；

8、有助于美容護膚。

茶多酚在常溫下呈淺黃或淺綠色粉末，易溶于溫水(40℃一80℃)和含水乙醇中；穩(wěn)定性極強，在ph值4—8、250℃左右的環(huán)境中，1.5個小時內(nèi)均能保持穩(wěn)定，在三價鐵離子下易分解。1989年被中國食品添加劑協(xié)會列入gb2760-89食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)，1997年列為中成藥原料。

目前對茶多酚的主要提取方法有三種，一種是乙酸乙酯提取，另一種是水提取，還有就是用乙醇提取。用乙酸乙酯提取茶葉中的茶多酚，產(chǎn)品顏色淡黃，但是乙酸乙酯是有機溶劑，有一定的毒性，不環(huán)保，并且得率不高，只有20％左右；用水提取茶多酚，很環(huán)保，但是得率很低，約15％，而且所提得的茶多酚顏色深綠。用乙醇提取茶多酚，顏色金黃，收率較高約30％左右。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所解決的現(xiàn)有技術(shù)問題是：現(xiàn)有的茶多酚的提取方法眾多，利用有機溶劑乙酸乙酯提取，得率低且不環(huán)保；利用水提取雖然環(huán)保，但是得率很低；單純利用乙醇提取，收率相對較高，但是仍然不能滿足茶多酚的提取效率的要求。

為此，本發(fā)明針對以上問題，提出了一種新的茶多酚的提取方法，綜合利用醇提取，水提取的優(yōu)勢，結(jié)合復(fù)合酶解，通過多手段結(jié)合，來提取茶多酚，極大的提高了茶多酚的提取產(chǎn)率。

茶葉中的有效成分多存在于茶葉植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。在提取過程中，溶劑需要克服來自細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)的傳質(zhì)阻力，來獲得更多的茶多酚。細(xì)胞壁是由纖維素、半纖維素、果膠質(zhì)等物質(zhì)構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)，通過選用合適的酶對茶多酚粉末進行預(yù)處理，能分解構(gòu)成細(xì)胞壁中的纖維素、半纖維素及果膠，從而破壞細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)，使得細(xì)胞壁局部產(chǎn)生坍塌、溶解、疏松，從而減少溶劑提取時來自細(xì)胞壁和細(xì)胞間質(zhì)的阻力，加快有效成分溶出細(xì)胞的速率，提高提取效率，縮短提取時間。而且通過酶解，可以作用于目標(biāo)產(chǎn)物，改善目標(biāo)產(chǎn)物的理化性質(zhì)，提高其在提取溶劑中的溶解度，減少溶劑的用量，降低成本；也可改善目標(biāo)產(chǎn)物的生理生化功能，從而提高其效用。然后將酶解產(chǎn)物利用清水和醇提取，可以保證提取效率，而且安全環(huán)保，無毒副作用。

具體來說，本發(fā)明提出了如下技術(shù)方案。

本發(fā)明提供了一種茶多酚的提取方法，包括如下步驟：

(1)向含有茶多酚的原料中加入水和酶，進行酶解，過濾得到濾餅和第一提取液；

(2)向濾餅中加入乙醇進行提取，過濾得到第二提取液；

(3)合并第一提取液和第二提取液，然后分離得到茶多酚。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(1)中所述酶選自果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶中的一種或兩種以上。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(1)中所述酶選自果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶中的兩種以上。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(1)中所述蛋白酶為中性蛋白酶。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(1)中酶的加入質(zhì)量，相對于含有茶多酚的原料的重量百分比為0.1％-1％，優(yōu)選為0.3％-0.7％。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，以含有茶多酚的原料計，對應(yīng)于每克含茶多酚的原料，步驟(1)所用到的果膠酶為30-300u，或者纖維素酶為35-350u，或者半纖維素酶為5-50u，或者蛋白酶為50-500u。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(1)中酶解溫度為25-50℃，優(yōu)選30-40℃。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(1)中酶解時間為35-70小時，優(yōu)選為45-60小時。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(1)酶解之后，在85-100℃溫度下進行滅活，然后再過濾得到濾餅和第一提取液。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(1)中相對于含有茶多酚的原料，水的質(zhì)量與含有茶多酚的原料的質(zhì)量比為3:1-10:1。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(2)中向濾餅中加入以體積含量計純度為50-90％的乙醇，優(yōu)選加入以體積含量計純度為60-80％的乙醇。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(2)中加入乙醇，循環(huán)提取兩次以上；優(yōu)選加入乙醇提取三次或四次。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，步驟(2)中加入乙醇提取的溫度為50-70℃，優(yōu)選為55-60℃。

優(yōu)選的，所述的提取方法中，在步驟(3)將第一提取液和第二提取液濃縮，然后利用大孔樹脂分離得到茶多酚純品。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，所述大孔樹脂選自d101、ab-8、x-5、lx-60或dm-130中的一種或幾種，優(yōu)選為d101。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，將第一提取液和第二提取液濃縮之前，進行活性炭脫色處理。

優(yōu)選的，以上所述的提取方法中，所述茶多酚的提取率為35％以上，優(yōu)選為35％-45％，純化后的茶多酚純度在98％以上。

本發(fā)明還提供了一種利用以上提取方法制備得到的茶多酚，所述茶多酚的純度在98％以上，所述茶多酚中ec、egc、egcg和ecg的含量占到茶多酚含量的85％以上。

另外，本發(fā)明還提供了以上所述的茶多酚在制備抗病毒、抗過敏藥物領(lǐng)域和美容護膚保健品領(lǐng)域中的應(yīng)用。

本發(fā)明所取得的有益效果是：本發(fā)明通過酶法結(jié)合水提和乙醇提取，作用于目標(biāo)產(chǎn)物，改善目標(biāo)產(chǎn)物的理化性質(zhì)，提高其在提取溶劑中的溶解度，減少溶劑的用量，降低成本；而且安全環(huán)保，無任何毒副作用。由本發(fā)明的提取方法提取茶多酚，可以極大的提高茶多酚的提取效率，并且提高茶多酚的純度，降低了茶多酚提取的成本，具有很重要的經(jīng)濟價值。

附圖說明

圖1為制備茶多酚的工藝流程圖。

具體實施方式

如上所述，本發(fā)明先利用酶解法將含有茶多酚的原料進行酶解，破壞細(xì)胞壁，并且在酶解的同時，利用水提取部分茶多酚，然后再利用乙醇進一步提取茶多酚，將提取液濃縮后得到茶多酚粗提物。然后利用大孔樹脂純化得到茶多酚純品。需要說明的是，本發(fā)明的方法在提取時，盡量避免堿性環(huán)境、氧化劑與高溫。而且因為茶多酚自身的性質(zhì)，即在冷水中溶解度不大，容易成為牛奶狀液體與水分層，而在熱水和乙醇中的溶解度非常好，所以在特定溫度下，進行水提和醇提，可以得到茶多酚純品。采用大孔樹脂，得到表沒食子兒茶素(egc)、表兒茶素(ec)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(egcg)、表兒茶素沒食子酸酯(ecg)等幾種單體。

圖1給出了本發(fā)明所提取的工藝流程圖，將茶葉粉碎，加入水和酶進行酶解，在酶解的同時，利用水提取部分茶多酚，過濾得到第一提取液和濾餅，向濾餅中加入乙醇繼續(xù)進行提取，過濾得到第二提取液，合并第一提取液和第二提取液，進行濃縮脫色處理，然后經(jīng)過大孔樹脂吸附，分段接收，得到不同分子量的茶多酚單體物質(zhì)，濃縮后烘干得到茶多酚純品。采用本發(fā)明的方法，可以利用含有茶多酚的原料提取茶多酚，包括各種含有茶多酚的茶葉，包括但不限于綠茶、烏龍茶、紅茶等，例如鐵觀音、碧螺春、龍井綠茶、黃山毛峰等。所述含有茶多酚的茶葉可以直接通過商購得到。

本發(fā)明具體提供了如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種茶多酚的提取方法，包括如下步驟：

(1)向含有茶多酚的原料中加入水和酶，在25-50℃下進行酶解，過濾得到濾餅和第一提取液，其中所述酶的加入質(zhì)量，相對于含有茶多酚的原料的重量百分比為0.1％-1％；

(2)向濾餅中加入50％-90％體積濃度的乙醇進行提取2-6次，過濾得到第二提取液；

(3)合并第一提取液和第二提取液，然后分離得到茶多酚。

其中，加入乙醇提取之后，過濾得到第二提取液和濾餅，然后再向濾餅中加入乙醇進行提取，以此重復(fù)2-6次，優(yōu)選3-4次。采用乙醇進行多次提取，可以將茶多酚里面的有效成分提出，其中每次乙醇用量不受限制，以能充分使濾餅形成漿液提取茶多酚即可，優(yōu)選濾餅與乙醇的質(zhì)量比例為(1:5)～(1:8)。注意在多次提取時，可以適當(dāng)減少乙醇的用量。

同時，通過本發(fā)明的提取方法，制備得到的茶多酚的純度在98％以上，茶多酚中ec、egc、egcg和ecg的含量占到茶多酚含量的85％以上。本發(fā)明方法制備得到的茶多酚，可以利用茶多酚的抗氧化性質(zhì)，應(yīng)用于制備各種藥物或者保健品領(lǐng)域，包括抗癌藥物、防治心血管疾病的藥物、抗血栓的藥物、防治腦中風(fēng)的藥物等。同時可以制備成保健品，提高機體的免疫調(diào)節(jié)能力和抗過敏能力等等。

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的具體實施方式進行說明。本發(fā)明實施例中所用到的原料、儀器及廠家等見表1。

表1實施例中所用的原料、儀器及廠家

表2實施例中所用到的原料信息

實施例一

實施例一提供了一種茶多酚的提取與純化工藝流程，包括如下實驗步驟：

(1)取干燥的碧螺春茶葉，粉碎，制得茶葉粉。然后取茶葉粉50g，加水300ml，然后加入0.1g半纖維素酶和0.05g纖維素酶，攪拌均勻后于35℃保溫48小時；

(2)升溫到90℃滅活，攪拌10min后，過濾，得到第一提取液和濾餅；

(3)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為70％濃度的乙醇300g，然后于60℃提取1h，過濾得到濾液和濾餅；繼續(xù)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為70％濃度的乙醇300g，然后于60℃提取1h，依此重復(fù)提取3次；合并濾液得到第二提取液；

(4)將第一提取液和第二提取液合并，用活性炭脫色得到脫色后的提取液，分2部分分別進行步驟(5)和(6)的處理；

(5)取出脫色后的部分提取液，直接在60℃下進行減壓濃縮，并在60℃真空下干燥，得到部分茶多酚粗提物；根據(jù)取出的部分提取液占提取液總量的比例，計算得到粗提物質(zhì)量，同時按照如下公式計算粗提物提取率：

粗提物提取率(％)＝(粗提物質(zhì)量)÷(投料重量)×100％(ⅰ)

然后將干燥得到的茶多酚粗提物，利用hplc檢測粗提物中茶多酚的質(zhì)量。具體的測定條件和測定方法如下：

準(zhǔn)確稱取以上制備得到的茶多酚粗提物樣品5mg，以乙腈為溶劑配成濃度為1mg/ml的樣品溶液，經(jīng)0.45μm微孔濾膜后備用。

色譜條件：色譜柱為依利特sinochromods-bp(4.6mm×200mm，5μm)；uv檢測波長為293nm；流動相為a純水，b乙腈，為改善峰形，采用梯度洗脫0～10min10％～100％b，10～15min100～10％b；進樣量5μl；柱溫為室溫。

對照品：準(zhǔn)確稱取茶多酚標(biāo)準(zhǔn)品5mg，用乙腈配成一系列的濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品儲備液，經(jīng)0.45μm微孔濾膜后進樣，得到不同濃度的對照標(biāo)準(zhǔn)品。

采用hplc的方法計算得到的茶多酚主質(zhì)量，然后利用如下公式計算粗提物中茶多酚主含量：

粗提物中茶多酚主含量(％)＝(粗提物中茶多酚主質(zhì)量)÷(進樣質(zhì)量)×100％(ⅱ)

(6)取出脫色后的部分提取液，然后在60℃下減壓濃縮去除80％的液體，將剩余液體通過d101大孔樹脂分離提純20min，得到純化后的茶多酚，在60℃真空下干燥得到純化后茶多酚主質(zhì)量。然后取純化后茶多酚5mg，然后按照步驟(5)所示的hplc的方法測定茶多酚的含量，然后利用如下公式計算得到純化后茶多酚主含量：

純化后茶多酚主含量(％)＝(hplc檢測的純化后茶多酚主質(zhì)量)÷(進樣質(zhì)量)×100％(ⅲ)

實驗平行測定三次，然后分別取平均值，測定結(jié)果見下表3。

實施例二

實施例二提供了一種茶多酚的提取與純化工藝流程，包括如下實驗步驟：

(1)取干燥的碧螺春茶葉，粉碎，制得茶葉粉。然后取茶葉粉50g，加水300ml，然后加入0.1g果膠酶、0.1g纖維素酶、0.1g半纖維素酶和0.1g蛋白酶，攪拌均勻后于40℃保溫60小時；

(2)升溫到90℃滅活，攪拌10min后，過濾，得到第一提取液和濾餅；

(3)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為80％濃度的乙醇300g，然后于55℃提取0.5h，過濾得到濾液和濾餅；繼續(xù)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為80％濃度的乙醇300g，然后于60℃提取0.5h，依此重復(fù)提取4次；合并濾液得到第二提取液；

(4)將第一提取液和第二提取液合并，用活性炭脫色得到脫色后的提取液，分2部分分別進行步驟(5)和(6)的處理；

(5)取出脫色后的部分提取液，直接在60℃下進行減壓濃縮，并在60℃真空下干燥，得到部分茶多酚粗提物；根據(jù)取出的部分提取液占提取液總量的比例，計算得到粗提物質(zhì)量，按照與實施例一相同的方法計算得到粗提物提取率。

然后將干燥得到的茶多酚粗提物，利用與實施例一相同的方法檢測粗提物中茶多酚的質(zhì)量。并按照與實施例一相同的公式計算粗提物中茶多酚主含量。

(6)取出脫色后的部分提取液，然后在60℃下減壓濃縮去除80％的液體，將剩余液體通過d101大孔樹脂分離提純20min，得到純化后的茶多酚，并在60℃真空下干燥得到純化后茶多酚主質(zhì)量。然后按照與實施例一相同的方法和公式，計算純化后茶多酚主質(zhì)量以及純化后茶多酚主含量。

測定結(jié)果見表3。

實施例三

實施例三提供了一種茶多酚的提取與純化工藝流程，包括如下實驗步驟：

(1)取干燥的碧螺春茶葉，粉碎，制得茶葉粉。然后取茶葉粉50g，加水300ml，然后加入0.1g果膠酶、0.1g纖維素酶、0.1g半纖維素酶和0.2g蛋白酶，攪拌均勻后于25℃保溫70小時；

(2)升溫到90℃滅活，攪拌10min后，過濾，得到第一提取液和濾餅；

(3)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為90％濃度的乙醇300g，然后于70℃提取1.5h，過濾得到濾液和濾餅；繼續(xù)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為90％濃度的乙醇300g，然后于70℃提取1.5h，依此重復(fù)提取3次；合并濾液得到第二提取液；

(4)將第一提取液和第二提取液合并，用活性炭脫色得到脫色后的提取液，分2部分分別進行步驟(5)和(6)的處理；

(5)取出脫色后的部分提取液，直接在60℃下進行減壓濃縮，并在60℃真空下干燥，得到部分茶多酚粗提物；根據(jù)取出的部分提取液占提取液總量的比例，計算得到粗提物質(zhì)量，按照與實施例一相同的方法計算得到粗提物提取率。

然后將干燥得到的茶多酚粗提物，利用與實施例一相同的方法檢測粗提物中茶多酚的質(zhì)量。并按照與實施例一相同的公式計算粗提物中茶多酚主含量。

(6)取出脫色后的部分提取液，然后在60℃下減壓濃縮去除80％的液體，將剩余液體通過x-5大孔樹脂分離提純20min，得到純化后的茶多酚，并在60℃真空下干燥得到純化后茶多酚主質(zhì)量。然后按照與實施例一相同的方法和公式，計算純化后茶多酚主質(zhì)量以及純化后茶多酚主含量。

測定結(jié)果見表3。

實施例四

實施例四提供了一種茶多酚的提取與純化工藝流程，包括如下實驗步驟：

(1)取干燥的碧螺春茶葉，粉碎，制得茶葉粉。然后取茶葉粉50g，加水300ml，然后加入0.1g果膠酶和0.1g纖維素酶，攪拌均勻后于50℃保溫35小時；

(2)升溫到90℃滅活，攪拌10min后，過濾，得到第一提取液和濾餅；

(3)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為50％濃度的乙醇300g，然后于50℃提取2h，過濾得到濾液和濾餅；繼續(xù)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為50％濃度的乙醇300g，然后于50℃提取2h，依此重復(fù)提取2次；合并濾液得到第二提取液；

(4)將第一提取液和第二提取液合并，用活性炭脫色得到脫色后的提取液，分2部分分別進行步驟(5)和(6)的處理；

(5)取出脫色后的部分提取液，直接在60℃下進行減壓濃縮，并在60℃真空下干燥，得到部分茶多酚粗提物；根據(jù)取出的部分提取液占提取液總量的比例，計算得到粗提物質(zhì)量，按照與實施例一相同的方法計算得到粗提物提取率。

然后將干燥得到的茶多酚粗提物，利用與實施例一相同的方法檢測粗提物中茶多酚的質(zhì)量。并按照與實施例一相同的公式計算粗提物中茶多酚主含量。

(6)取出脫色后的部分提取液，然后在60℃下減壓濃縮去除80％的液體，將剩余液體通過ab-8樹脂分離提純20min，得到純化后的茶多酚，并在60℃真空下干燥得到純化后茶多酚主質(zhì)量。然后按照與實施例一相同的方法和公式，計算純化后茶多酚主質(zhì)量以及純化后茶多酚主含量。

測定結(jié)果見表3。

實施例五

實施例五提供了一種茶多酚的提取與純化工藝流程，包括如下實驗步驟：

(1)取干燥的碧螺春茶葉，粉碎，制得茶葉粉。然后取茶葉粉50g，加水300ml，然后加入0.1g果膠酶、0.2g纖維素酶、0.1g半纖維素酶和0.1g蛋白酶，攪拌均勻后于55℃保溫4小時；

(2)升溫到90℃滅活，攪拌10min后，過濾，得到第一提取液和濾餅；

(3)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為70％濃度的乙醇300g，然后于80℃提取1h，過濾得到濾液和濾餅；繼續(xù)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為70％濃度的乙醇300g，然后于60℃提取1h，依此重復(fù)提取3次；合并濾液得到第二提取液；

(4)將第一提取液和第二提取液合并，用活性炭脫色得到脫色后的提取液，分2部分分別進行步驟(5)和(6)的處理；

(5)取出脫色后的部分提取液，直接在60℃下進行減壓濃縮，并在60℃真空下干燥，得到部分茶多酚粗提物；根據(jù)取出的部分提取液占提取液總量的比例，計算得到粗提物質(zhì)量，按照與實施例一相同的方法計算得到粗提物提取率。

然后將干燥得到的茶多酚粗提物，利用與實施例一相同的方法檢測粗提物中茶多酚的質(zhì)量。并按照與實施例一相同的公式計算粗提物中茶多酚主含量。

(6)取出脫色后的部分提取液，然后在60℃下減壓濃縮去除80％的液體，將剩余液體通過d101大孔樹脂分離提純20min，得到純化后的茶多酚，并在60℃真空下干燥得到純化后茶多酚主質(zhì)量。然后按照與實施例一相同的方法和公式，計算純化后茶多酚主質(zhì)量以及純化后茶多酚主含量。

測定結(jié)果見表3。

實施例六

實施例六提供了一種茶多酚的提取與純化工藝流程，包括如下實驗步驟：

(1)取干燥的碧螺春茶葉，粉碎，制得茶葉粉。然后取茶葉粉50g，加水300ml，然后加入0.1g果膠酶、0.1g纖維素酶和0.1g蛋白酶，攪拌均勻后于35℃保溫48小時；

(2)升溫到90℃滅活，攪拌10min后，過濾，得到第一提取液和濾餅；

(3)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為15％濃度的乙醇300g，然后于80℃提取2h，過濾得到濾液和濾餅；繼續(xù)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為15％濃度的乙醇300g，然后于80℃提取2h，依此重復(fù)提取3次；合并濾液得到第二提取液；

(4)將第一提取液和第二提取液合并，用活性炭脫色得到脫色后的提取液，分2部分分別進行步驟(5)和(6)的處理；

(5)取出脫色后的部分提取液，直接在60℃下進行減壓濃縮，并在60℃真空下干燥，得到部分茶多酚粗提物；根據(jù)取出的部分提取液占提取液總量的比例，計算得到粗提物質(zhì)量，按照與實施例一相同的方法計算得到粗提物提取率。

然后將干燥得到的茶多酚粗提物，利用與實施例一相同的方法檢測粗提物中茶多酚的質(zhì)量。并按照與實施例一相同的公式計算粗提物中茶多酚主含量。

(6)取出脫色后的部分提取液，然后在60℃下減壓濃縮去除80％的液體，將剩余液體通過d101大孔樹脂分離提純20min，得到純化后的茶多酚，并在60℃真空下干燥得到純化后茶多酚主質(zhì)量。然后按照與實施例一相同的方法和公式，計算純化后茶多酚主質(zhì)量以及純化后茶多酚主含量。

測定結(jié)果見表3。

實施例七

實施例七提供了一種茶多酚的提取與純化工藝流程，包括如下實驗步驟：

(1)取干燥的碧螺春茶葉，粉碎，制得茶葉粉。然后取茶葉粉50g，加水300ml，然后加入0.2g果膠酶、0.1g纖維素酶、0.1g半纖維素酶和0.1g蛋白酶，攪拌均勻后于35℃保溫48小時；

(2)升溫到90℃滅活，攪拌10min后，過濾，得到第一提取液和濾餅；

(3)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為30％濃度的乙醇300g，然后于60℃提取1h，過濾得到濾液和濾餅；繼續(xù)向濾餅中加入體積分?jǐn)?shù)為30％濃度的乙醇300g，然后于60℃提取1h，依此重復(fù)提取4次；合并濾液得到第二提取液；

(4)將第一提取液和第二提取液合并，用活性炭脫色得到脫色后的提取液，分2部分分別進行步驟(5)和(6)的處理；

(5)取出脫色后的部分提取液，直接在60℃下進行減壓濃縮，并在60℃真空下干燥，得到部分茶多酚粗提物；根據(jù)取出的部分提取液占提取液總量的比例，計算得到粗提物質(zhì)量，按照與實施例一相同的方法計算得到粗提物提取率。

然后將干燥得到的茶多酚粗提物，利用與實施例一相同的方法檢測粗提物中茶多酚的質(zhì)量。并按照與實施例一相同的公式計算粗提物中茶多酚主含量。

(6)取出脫色后的部分提取液，然后在60℃下減壓濃縮去除80％的液體，將剩余液體通過d101大孔樹脂分離提純20min，得到純化后的茶多酚，并在60℃真空下干燥得到純化后茶多酚主質(zhì)量。然后按照與實施例一相同的方法和公式，計算純化后茶多酚主質(zhì)量以及純化后茶多酚主含量。

測定結(jié)果見表3。

表3不同實施例所制得的茶多酚的檢測結(jié)果

從表3可以看出，利用本發(fā)明實施例一到實施例五的方法提取制備得到茶多酚，茶多酚粗提物提取率相較于實施例六和實施例七，提取率更高，均在30％以上，提取率甚至達到將近40％。而且能夠保證粗提物中茶多酚的主含量在91％以上，純化后茶多酚主含量在98％以上。因此，采用本發(fā)明的實施例中給出的方法，使得茶多酚產(chǎn)品的產(chǎn)率提高，可以降低茶多酚的提取成本。應(yīng)用于生產(chǎn)時，可以極大的降低成本。實施例六和實施例七降低了提取時醇的濃度，導(dǎo)致所制備得到的粗提物的產(chǎn)率僅在25％左右，相較于實施例一到實施例五，提取率要低的多。實驗過程中發(fā)現(xiàn)，乙醇提取的濃度對于茶多酚的提取效率非常關(guān)鍵。當(dāng)乙醇濃度低時，提取率顯著降低。本發(fā)明實施例給出的提取工藝，通過稍高濃度的乙醇可以極大的提高醇提的效率，大大降低茶多酚的提取成本，給生產(chǎn)帶來極大的經(jīng)濟價值。

以上所述，僅是本發(fā)明實施的較佳實施例，并非對本發(fā)明做任何形式上的限制，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所做的修改、等同替換和改進等，均需要包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。

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