本發(fā)明涉及中藥鑒別領(lǐng)域，特別是一種番石榴葉炮制品的鑒別方法。

背景技術(shù)

番石榴葉為桃金娘科植物番石榴(psidiumguajaval.)的葉。在福建、中國臺灣、廣東、廣西、四川和云南等地均有分布或栽培。具有燥濕健脾，清熱解毒之功效。常用于治療瀉痢腹痛，食積腹脹，齒齦腫痛，風(fēng)濕痹痛，濕疹臁瘡，疔瘡腫毒，跌打腫痛，外傷出血，蛇蟲咬傷。

番石榴葉通過炮制后，加強了藥物效用，減除毒性或副作用，便于貯藏和便于服用。

關(guān)于番石榴葉的生品的質(zhì)量標準已有記載，但是番石榴葉炮制品的檢測方法還沒有記載。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的一個目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種簡單方便檢測番石榴葉炮制品的方法，可有效解決番石榴葉炮制品的鑒定問題。

為了實現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點，提供了一種番石榴葉炮制品的鑒別方法，包括以下步驟：

步驟一、分別制備番石榴葉炮制品對照藥材溶液和供試品溶液；

步驟二、將番石榴葉炮制品對照藥材溶液和供試品溶液均按照薄層色譜法試驗，得番石榴葉炮制品對照藥材薄層色譜和供試品溶液薄層色譜；

步驟三、對比番石榴葉炮制品對照藥材薄層色譜和供試品薄層色譜。

優(yōu)選的是，番石榴葉炮制品對照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對照藥材1-3g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液30-80ml，經(jīng)超聲處理0.5-1h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取1-3次，每次5-20ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇1-3ml，作為番石榴葉炮制品對照藥材溶液。

優(yōu)選的是，供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品1-3g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液30-80ml，經(jīng)超聲處理0.5-1h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取1-3次，每次5-20ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇1-3ml，作為供試品溶液。

優(yōu)選的是，薄層色譜法試驗采用的薄層色譜展開板為硅膠g薄層板。

優(yōu)選的是，薄層色譜法試驗所采用的展開劑為石油醚-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇的混合溶液，其中石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇的體積比為10-30:10:1:1，石油醚選擇沸程為60℃-90℃的產(chǎn)品。

優(yōu)選的是，薄層色譜法試驗中，將展開后的薄層板晾干，并浸泡10％硫酸乙醇溶液，再加熱顯色至斑點清晰。

優(yōu)選的是，薄層色譜法試驗中進行點樣時，供試品溶液及番石榴葉炮制品對照藥材溶液需要點在同一塊薄層板上。

優(yōu)選的是，進行薄層色譜法試驗操作時的環(huán)境溫度為10-60℃，相對濕度為45％-70％。

優(yōu)選的是，硅膠g薄層板在使用前經(jīng)過90-105℃的烘干活化處理。

本發(fā)明至少包括以下有益效果：本發(fā)明方法操作簡便、快速、穩(wěn)定可靠、準確性強、薄層色譜中各斑點分離效果好、有效用于番石榴葉炮制品的鑒定，為番石榴葉炮制品的鑒定提供技術(shù)保障，具有良好的經(jīng)濟和社會效益。

本發(fā)明的其它優(yōu)點、目標和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本發(fā)明的研究和實踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。

附圖說明

圖1為本發(fā)明的番石榴葉炮制品對照藥材和11份不同批次供試品的薄層色譜圖，1為番石榴葉炮制品對照藥材，2-12為11份不同批次供試品；

圖2為本發(fā)明所述環(huán)境溫度為10℃，相對濕度為70％的薄層色譜圖，1為番石榴葉炮制品對照藥材，2為供試品；

圖3為本發(fā)明所述環(huán)境溫度為60℃，相對濕度為45％的薄層色譜圖，1為番石榴葉炮制品對照藥材，2為供試品；

圖4為本發(fā)明所述薄層色譜法試驗中展開劑為石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比為30：10：1：1時的薄層色譜圖，1為番石榴葉炮制品對照藥材，2為供試品；

圖5為本發(fā)明所述薄層色譜法試驗中展開劑為石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比為10：10：1：1時的薄層色譜圖，1為番石榴葉炮制品對照藥材，2為供試品；

圖6為本發(fā)明所述薄層色譜法試驗中實施例6，僅用石油醚提取后，進行薄層色譜分寫的薄層色譜圖，1為番石榴葉生品，2為番石榴葉炮制品；

圖7為本發(fā)明所述薄層色譜法試驗中實施例7，不提取，直接用甲醇溶解后點樣，進行薄層色譜分寫的薄層色譜圖，1為番石榴葉生品，2為番石榴葉炮制品。

具體實施方式

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明做進一步的詳細說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。

<實施例1>

番石榴葉炮制品對照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對照藥材2g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為番石榴葉炮制品對照藥材溶液。

供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品2g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為供試品溶液。

薄層色譜法試驗:

用毛細管吸取番石榴葉炮制品對照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比20:10:1:1為展開劑，點樣后，把展開劑倒進展開缸預(yù)飽和后展開，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與番石榴葉炮制品對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，從而實現(xiàn)利用薄層色譜對番石榴葉炮制品的鑒定，薄層色譜圖見附圖1。

<實施例2>

番石榴葉炮制品對照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對照藥材2g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為番石榴葉炮制品對照藥材溶液。

供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品2g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為供試品溶液。

薄層色譜法試驗:

用毛細管吸取番石榴葉炮制品對照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，在環(huán)境溫度為10℃，相對濕度為70％條件下，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比20:10:1:1為展開劑，點樣后，把展開劑倒進展開缸預(yù)飽和后展開，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與番石榴葉炮制品對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，從而實現(xiàn)利用薄層色譜對番石榴葉炮制品的鑒定，薄層色譜圖見附圖2。

<實施例3>

番石榴葉炮制品對照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對照藥材2g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為番石榴葉炮制品對照藥材溶液。

供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品2g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為供試品溶液。

薄層色譜法試驗:

用毛細管吸取番石榴葉炮制品對照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，在環(huán)境溫度為60℃，相對濕度為45％條件下，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比20:10:1:1為展開劑，點樣后，把展開劑倒進展開缸預(yù)飽和后展開，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與番石榴葉炮制品對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，從而實現(xiàn)利用薄層色譜對番石榴葉炮制品的鑒定，薄層色譜圖見附圖3。

根據(jù)上述實施例可以得出，本發(fā)明的番石榴葉炮制品的鑒別方法具有很廣的濕度和溫度耐受性，穩(wěn)定可靠。

<實施例4>

番石榴葉炮制品對照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對照藥材2g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為番石榴葉炮制品對照藥材溶液。

供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品2g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為供試品溶液。

薄層色譜法試驗:

用毛細管吸取番石榴葉炮制品對照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比30:10:1:1為展開劑，點樣后，把展開劑倒進展開缸預(yù)飽和后展開，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與番石榴葉炮制品對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，從而實現(xiàn)利用薄層色譜對番石榴葉炮制品的鑒定，薄層色譜圖見附圖4。

<實施例5>

番石榴葉炮制品對照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對照藥材2g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為番石榴葉炮制品對照藥材溶液。

供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品2g，碾碎成粉末，粉末過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為供試品溶液。

薄層色譜法試驗:

用毛細管吸取番石榴葉炮制品對照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比10:10:1:1為展開劑，點樣后，把展開劑倒進展開缸預(yù)飽和后展開，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與番石榴葉炮制品對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，從而實現(xiàn)利用薄層色譜對番石榴葉炮制品的鑒定，薄層色譜圖見附圖5。

根據(jù)上述實施例可以得出，本發(fā)明的番石榴葉炮制品的鑒別方法再展開劑的選取上有很廣泛的耐受性，穩(wěn)定可靠。

<實施例6>

番石榴葉生品溶液制備方法如下：

稱定番石榴葉生品2g，碾碎，過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，濃縮至2ml，作為生品溶液。

番石榴葉炮制品溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品2g，碾碎成粉末，過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加水溶解，用石油醚提取2次，每次10ml，合并石油醚提取液，濃縮至2ml，作為番石榴葉炮制品對照藥材溶液。

薄層色譜法試驗:

用毛細管吸取番石榴生品溶液和番石榴葉炮制品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比20:10:1:1為展開劑，點樣后，把展開劑倒進展開缸預(yù)飽和后展開，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點清晰。

在對比色譜中，番石榴葉生品色譜與番石榴葉炮制品色譜在相應(yīng)的位置上，斑點有明顯差別，得出番石榴葉生品與番石榴葉炮制品在化學(xué)成分上有明顯不同，薄層色譜圖見附圖6。

<實施例7>

番石榴葉生品溶液制備方法如下：

稱定番石榴葉生品2g，碾碎，過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇2ml溶解，作為生品溶液。

番石榴葉炮制品溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品2g，碾碎成粉末，過篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇2ml溶解，作為番石榴葉炮制品溶液。

薄層色譜法試驗:

用毛細管吸取番石榴葉炮制品對照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比20:10:1:1為展開劑，點樣后，把展開劑倒進展開缸預(yù)飽和后展開，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點清晰。

在對比色譜中，明顯可以看出斑點很多，分離不開，得出采用石油醚進行提取后再進行薄層色譜分析是有必要的，薄層色譜圖見附圖7。

由上述可知，本發(fā)明提供了一種利用薄層色譜法鑒定番石榴葉炮制品的方法，該方法操作簡便、快速、專屬性強、薄層色譜中各斑點分離效果良好，可有效用于番石榴葉炮制品的質(zhì)量鑒定。

另外發(fā)明人針對番石榴葉生品也進行了薄層色譜分析研究，對照番石榴葉炮制品，發(fā)現(xiàn)番石榴葉生品和番石榴葉炮制品再化學(xué)成份上有明顯不同，番石榴葉生品已有質(zhì)量標準，因此針對番石榴葉炮制品的檢測方法進行了研究。

盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細節(jié)和這里示出與描述的圖例。

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