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人參果抗腫瘤細(xì)胞研究
本文作者：李麗靜 張亞杰 劉 佳 吳世佳 張 淞 王 蔚 王 威 王繼彥 單位：長(zhǎng)春中醫(yī)藥高校藥學(xué)院中藥藥理教研室
人參PanaxginsengC．A．Meyer為五加科人參屬植物，不但其根藥用且其莖)，每組均設(shè)4復(fù)孔。共同培育48h后，每孔加入20μL的5%MTT，再培育4h棄上清，每孔加入150μL的DMSO振蕩10min，應(yīng)用酶標(biāo)儀于570nm處測(cè)吸光度值(A)。按如下公式計(jì)算抑制率:抑制率=(陰性對(duì)比A-樣品A陰性對(duì)比A)×100%。
×106個(gè)接種于50mL培育瓶中，培育24h后，，培育0h、6h、12h、18h、24h和30h后，1500r/min離心5min，收集貼壁及懸浮細(xì)胞，%戊二醛固定，再用1%鋨酸固定后乙醇脫水，Epon812環(huán)氧樹(shù)脂包埋，LKB-Ⅲ型超薄切片機(jī)半薄切片定位后做超薄切片，醋酸雙氧鈾及檸檬酸鉛雙重染色，透射電鏡下觀看形態(tài)轉(zhuǎn)變并拍攝照片。
-A1細(xì)胞0h、6h、12h、18h、24h，提取蛋白質(zhì)進(jìn)行Western免疫印記法操作，檢測(cè)周期相關(guān)蛋白cyclin及其相關(guān)激酶CDK2和CDK1的蛋白表達(dá)量。
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。
2結(jié)果
，接受MTT法，人肺腺癌細(xì)胞(SPC-A1)、人胃腺癌(SGC-7901)、人宮頸癌細(xì)胞(Hela)、人結(jié)腸癌細(xì)胞(SW-111C)和人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞(U251)等5個(gè)人腫瘤細(xì)胞株的作用;，對(duì)5種腫瘤細(xì)胞增殖均有不同程度的抑制作用，其中對(duì)SPC-A1細(xì)胞的作用最強(qiáng)。
-A1細(xì)胞形態(tài)學(xué)電鏡觀看電鏡下觀看，未加藥物組細(xì)胞形態(tài)完整，呈略不規(guī)章形，細(xì)胞表面微絨毛豐富，核呈不規(guī)章形，核仁明顯，胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)線粒體，嵴清晰，細(xì)胞橋小體使細(xì)胞彼此黏附連接成完整的單層細(xì)胞;，隨藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞呈現(xiàn)凋亡轉(zhuǎn)變，藥物作用6h可見(jiàn)細(xì)胞表面微絨毛脫落，核小，胞質(zhì)內(nèi)部分線粒體腫脹，嵴斷裂，有較多溶酶體產(chǎn)生;藥物作用12h，細(xì)胞表面微絨毛消逝，核仁明顯，胞質(zhì)內(nèi)消逝大量空泡狀結(jié)構(gòu);藥物作用18h，細(xì)胞核內(nèi)異染色體趨邊分散呈塊狀，并可見(jiàn)胞質(zhì)內(nèi)髓樣小體;藥物作用24h、30h，已清晰可見(jiàn)細(xì)胞膜包裹細(xì)胞器或核片段形成典型的凋亡小體。圖1顯示，通過(guò)上述SPC-，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)(0h、6h、12h、18h、24h和30h)，肺癌細(xì)胞在超微結(jié)構(gòu)上發(fā)生變化，細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)消逝比較典型的細(xì)胞凋亡的特征，從形態(tài)學(xué)上進(jìn)一步證明，人生果皂苷誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞凋亡是其抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用機(jī)制之一。
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，、6h、12h、18h、24h

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