隨著人類對(duì)于自然環(huán)境的關(guān)注度與日俱增，動(dòng)物保護(hù)組織以及輿論界對(duì)于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的關(guān)注度也達(dá)到了人類文明史從所未有的高度，更重要的是，現(xiàn)有的科學(xué)技術(shù)已經(jīng)有能力設(shè)計(jì)出合理可靠的非動(dòng)物模擬實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的全面禁止和被其 他實(shí)驗(yàn)方法替代是時(shí)代的需要和未來(lái)的展望。

在工業(yè)界，化妝品顯然走在了化學(xué)品的前面，其中影響力最廣的要屬歐盟的化妝品法規(guī)（Cosmetics Regulation (EC)No 1223/2009）。雖然化妝品的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)禁令不是由歐盟獨(dú)創(chuàng)，澳大利亞和新西蘭早在十多年前就實(shí)行了化妝品的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)禁令，不過(guò)歐盟作為世界上影響力最大的地區(qū)之一，其法規(guī)對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的態(tài)度對(duì)于全球化妝品法規(guī)，乃至化學(xué)品法規(guī)的影響力是澳大利亞和新西蘭所遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能匹及的。

2003年，歐盟化妝品76/768/EEC指令(1223/2009/EC的前身)迎來(lái)其一次重要修訂---第七次修訂，明確規(guī)定了歐盟境內(nèi)的化妝品將逐步、全面禁止動(dòng)物實(shí)驗(yàn)（圖1）?？傮w來(lái)講，有兩大原則：

確定的3個(gè)具體時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)過(guò)后禁令的覆蓋面會(huì)越來(lái)越廣，直至全面禁止動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；

一旦有動(dòng)物替代實(shí)驗(yàn)方法經(jīng)過(guò)了歐盟聯(lián)合實(shí)驗(yàn)中心（JRC）所屬的歐盟替代試驗(yàn)評(píng)估中心（ECVAM）驗(yàn)證和被歐盟法規(guī)采納，那么相對(duì)應(yīng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)就必須采用替代試驗(yàn)。

圖1. 歐盟化妝品動(dòng)物實(shí)驗(yàn)禁令一覽

啟動(dòng)：

第一個(gè)里程碑式的時(shí)間點(diǎn)：2004年9月。歐盟要求所有針對(duì)化妝品成品的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)全面禁止。

實(shí)際上，在歐盟某些地方，例如英國(guó)，針對(duì)化妝品成品和成分的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)早在1997年和1998年就禁止了?；瘖y品業(yè)界在第七次修訂出臺(tái)前就開(kāi)始探索動(dòng)物替代試驗(yàn)，早在近20年前（1992年），歐洲化妝品協(xié)會(huì)（Colipa）就成立了動(dòng)物替代實(shí)驗(yàn)執(zhí)行委員會(huì)（SCAAT），其成員企業(yè)已投入了2千5百萬(wàn)歐元的資金用于開(kāi)發(fā)系統(tǒng)性毒理試驗(yàn)的替代方法，同時(shí)歐盟委員會(huì)為其配比了1:1的研究資金，使整項(xiàng)投資達(dá)到了5千萬(wàn)歐元。2005年，歐盟動(dòng)物替代實(shí)驗(yàn)伙伴組織（EPAA）啟動(dòng)，其聯(lián)合歐盟委員會(huì)和有實(shí)力的大型企業(yè)一起應(yīng)對(duì)動(dòng)物替代試驗(yàn)，其中成員過(guò)半是化妝品企業(yè)（19/37）。

發(fā)展：

第二個(gè)時(shí)間點(diǎn)：距離我們最近的2009年3月。歐盟要求禁止對(duì)化妝品成分進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，并且禁止對(duì)成品或者成分進(jìn)行過(guò)局部/急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的化妝品銷售。

至今為止，通過(guò)各方的努力，已經(jīng)有4大類毒理實(shí)驗(yàn)已有可靠的動(dòng)物替代實(shí)驗(yàn)，并通過(guò)了ECVAM的驗(yàn)證：皮膚腐蝕性實(shí)驗(yàn)、光毒性實(shí)驗(yàn)、經(jīng)皮吸收實(shí)驗(yàn)、皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)，第5類---體外經(jīng)皮吸收/經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)也已經(jīng)被OECD正式采納。不過(guò)，眼部刺激性實(shí)驗(yàn)、皮膚致敏性實(shí)驗(yàn)、基因毒性/致畸性實(shí)驗(yàn)、全身毒性實(shí)驗(yàn)（包括重復(fù)劑量實(shí)驗(yàn)）還在探索中，目前沒(méi)有可靠的替代方案。

從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)禁令執(zhí)行以來(lái)，該理念已經(jīng)深入人心，法規(guī)由于得到了輿論的支持，宣傳、普及和執(zhí)行都格外順利，不僅僅涉及到了所有的化妝品企業(yè)，還影響了歐盟的GLP實(shí)驗(yàn)室。瑞歐科技在聯(lián)系歐盟GLP實(shí)驗(yàn)室過(guò)程中，就已遇到過(guò)需要簽署測(cè)試對(duì)象（化妝品物質(zhì)）承諾非化妝品用途的聲明。

展望和憂慮：

第三個(gè)時(shí)間點(diǎn)是2013年3月，屆時(shí)歐盟將禁止銷售對(duì)成品或者成分進(jìn)行過(guò)重復(fù)劑量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的化妝品。

但是，歐盟化妝品原料聯(lián)盟（EFfCI）早期對(duì)于目前8類涉及到動(dòng)物的毒理實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了全面評(píng)估，認(rèn)為只有光毒性和經(jīng)皮吸收實(shí)驗(yàn)是可靠有效且應(yīng)用面較廣。目前時(shí)間已經(jīng)到達(dá)2010年底，歐盟委員會(huì)的不少官員對(duì)于目前的替代實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)展深表憂慮，認(rèn)為在13年強(qiáng)行全面禁止動(dòng)物實(shí)驗(yàn)有可能會(huì)使化妝品對(duì)人體的安全性得不到保證。

我們很難預(yù)計(jì)到達(dá)2013年動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的替代方法是否能夠成熟應(yīng)用于大部分的化妝品，特別是重復(fù)劑量的毒理學(xué)試驗(yàn)是否能找到切實(shí)可行的解決方案，但有一點(diǎn)是確定的:歐盟對(duì)于動(dòng)物試驗(yàn)的態(tài)度是明確的，盡可能的減少動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是時(shí)代要求和大勢(shì)所趨。根據(jù)歐盟議會(huì)07年的對(duì)歐盟境內(nèi)科學(xué)研究的動(dòng)物試驗(yàn)第五次調(diào)查報(bào)告（圖2），歐盟化妝品動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與歐盟境內(nèi)的所有動(dòng)物試驗(yàn)相比是滄海一粟（0.025%），所以針對(duì)化妝品的嚴(yán)格的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)禁令可以看作是歐盟化學(xué)界的一個(gè)試點(diǎn)。

圖2. 歐盟化妝品動(dòng)物實(shí)驗(yàn)比例圖

REACH法規(guī)中的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：

歐盟境內(nèi)涉及面最廣，涉及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)最廣的REACH法規(guī)，雖然沒(méi)有直接禁止動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，但法規(guī)要求強(qiáng)制共享脊椎動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，并在進(jìn)行新的脊椎動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前需要先提交實(shí)驗(yàn)方案。另外，ECHA認(rèn)可類似于定量構(gòu)效關(guān)系（QSAR）、交叉互讀（Read-across）的非測(cè)試實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，也在一定程度上起到了避免重復(fù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，減少了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的消耗量。

根據(jù)REACH的時(shí)間段，2010年11月30日作為第一個(gè)注冊(cè)截止期，大量的卷宗將會(huì)含有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方案以及QSAR的數(shù)據(jù)。ECHA接下來(lái)的任務(wù)將非常重，一要評(píng)估動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案，決定是否有必要需要企業(yè)補(bǔ)充動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；而是評(píng)估QSAR等數(shù)據(jù)節(jié)點(diǎn)的可靠性。所以在未來(lái)的幾年，ECHA將會(huì)致力于為評(píng)估動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案制定一個(gè)統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)ECHA最新研討會(huì)公布的預(yù)期，在2012年底前將會(huì)由專家評(píng)估400-800份提交的實(shí)驗(yàn)方案，在2014年底將會(huì)完成800-1100份符合性檢查。 

總體來(lái)說(shuō)，REACH和CLP法規(guī)很難完全脫離動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，而目前的非測(cè)試方法發(fā)展方向與化妝品法規(guī)僅有部分交集，即使用QSAR-預(yù)估數(shù)據(jù)模型來(lái)得到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，至于人造模擬皮膚，體外細(xì)胞試驗(yàn)的數(shù)據(jù)還未能在REACH法規(guī)中有所作為。

中國(guó)化學(xué)品和化妝品中的動(dòng)物試驗(yàn)：

中國(guó)目前的化學(xué)品和化妝品法規(guī)雖然都在積極借鑒不少歐盟的先進(jìn)法規(guī)經(jīng)驗(yàn)，但在對(duì)于動(dòng)物替代實(shí)驗(yàn)的態(tài)度上都還比較保守。

就《中國(guó)新化學(xué)物質(zhì)環(huán)境管理辦法》（常被稱為“China REACH”）而言，QSAR、Read-across數(shù)據(jù)目前看來(lái)只是最后的一種解決辦法，即非常規(guī)的數(shù)據(jù)提供方式，申報(bào)時(shí)僅供參考，是否能通過(guò)還是需要經(jīng)過(guò)專家審核。

樂(lè)觀的一方面是，除了某些實(shí)驗(yàn)節(jié)點(diǎn)規(guī)定了必須采用中國(guó)的供試物種在指定實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，China REACH允許引用國(guó)外數(shù)據(jù)。避免了重復(fù)實(shí)驗(yàn)的同時(shí)也為跨國(guó)申報(bào)者節(jié)約了大量實(shí)驗(yàn)費(fèi)用。同時(shí)在2014年最新修訂的《化妝品測(cè)試方法》健康效應(yīng)卷（第二版）中收錄了不少國(guó)外成熟的動(dòng)物替代試驗(yàn)方法。

再看中國(guó)的化妝品法規(guī)，對(duì)于進(jìn)口化妝品和新原料申報(bào)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依然是唯一的選擇，不少歐盟進(jìn)口的化妝品由于在歐洲未經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，不得不重新為符合中國(guó)的化妝品法規(guī)重新進(jìn)行整套動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。而且除了防曬類成品和化妝品新原料外，其他產(chǎn)品不能引用國(guó)外實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。不過(guò)我們也看到了食藥總局已針對(duì)國(guó)產(chǎn)非特化妝品，允許采用安全性評(píng)估的方式替代毒理試驗(yàn)。 

中國(guó)的替代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究起步不久，中國(guó)替代方法研究評(píng)價(jià)中心申報(bào)替代方法標(biāo)準(zhǔn)制訂計(jì)劃在2010年7月才獲批準(zhǔn)，根據(jù)計(jì)劃2年內(nèi)將完成6項(xiàng)體外實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)方法涉及替代方法的驗(yàn)證、樣品處理、眼刺激性、皮膚刺激和吸入毒性以及部分化妝品功效檢測(cè)。而直至2014年年末，CFDA依然沒(méi)有正式發(fā)文接受任何一項(xiàng)替代毒理試驗(yàn)方法，與歐盟化妝品界的進(jìn)展相比，已落后10多年之久。 

后語(yǔ)：

正由于歐盟化妝品法規(guī)有嚴(yán)格的動(dòng)物禁令，而且動(dòng)物保護(hù)組織和輿論的壓力巨大，化妝品未經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不僅深入人心，還是歐盟化妝品品牌宣傳的有力武（器；但當(dāng)國(guó)際大企業(yè)出口化妝品至其他國(guó)家（如中國(guó)），或者應(yīng)對(duì)歐盟化學(xué)品法規(guī)（如化妝品原料需要應(yīng)對(duì)REACH），就會(huì)遇到歐盟化妝品法規(guī)與其他法規(guī)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)要求發(fā)生沖突，和替代實(shí)驗(yàn)認(rèn)可的問(wèn)題；對(duì)此歐盟化妝品原料聯(lián)盟（EFfCI）給出了自己的觀點(diǎn)：若為了應(yīng)對(duì)歐盟本地其他法規(guī)或者非歐盟地區(qū)的其他法規(guī)，動(dòng)物測(cè)試本身還是允許的，歐盟化妝品法規(guī)的動(dòng)物測(cè)試禁令的對(duì)象只是歐盟境內(nèi)涉及化妝品用途的產(chǎn)品和原料。

此外，對(duì)于歐盟化妝品法規(guī)現(xiàn)有的替代實(shí)驗(yàn)，目前除了部分項(xiàng)目已被中國(guó)環(huán)境保護(hù)部剛剛認(rèn)可外，都未獲得衛(wèi)生部或國(guó)家食藥總局的承認(rèn)。

此類實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)最終替代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需要兩方面的配合，一是隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，替代實(shí)驗(yàn)方法的科學(xué)性，可靠性的進(jìn)一步確認(rèn)，而目前即使是歐盟化妝品法規(guī)所用的替代實(shí)驗(yàn)依然還有很長(zhǎng)的路要走；另一方面是其余的法規(guī)認(rèn)可未來(lái)的發(fā)展成熟后的替代實(shí)驗(yàn)。

所以在當(dāng)前的情形下，國(guó)際化妝品企業(yè)出口產(chǎn)品至中國(guó)時(shí)，無(wú)論是應(yīng)對(duì)China REACH或中國(guó)化妝品法規(guī)，大部分情況下動(dòng)物實(shí)驗(yàn)還是不可避免的環(huán)節(jié)。瑞歐科技具有豐富的應(yīng)對(duì)以上法規(guī)的經(jīng)驗(yàn)和成功案例，有足夠的資質(zhì)和能力為企業(yè)提供最優(yōu)的解決方案。