首頁資訊一種黑木耳提取物及其在降血脂藥物及保健食品中的應(yīng)用的制作方法

一種黑木耳提取物及其在降血脂藥物及保健食品中的應(yīng)用的制作方法

來源：泰然健康網(wǎng) 時間：2024年12月18日 18:07

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有降血脂作用的黑木耳三萜類化合物提取物在制備降血脂藥物及保健食品中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

黑木耳(auriculariaauricula)別名為木耳、耳子、云耳和細(xì)木耳等，屬真菌門、擔(dān)子菌亞門、擔(dān)子菌綱、木耳目、木耳科、木耳屬。它營養(yǎng)豐富，食味鮮美，不但是營養(yǎng)價值很高的食用菌，而且是藥用價值較高的藥用菌，是世界公認(rèn)的保健品?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為黑木耳具有降壓、調(diào)脂、保肝和改善腎功能等功效，是中醫(yī)藥食療心腦血管疾病、高脂血癥、便秘的代表性食物。

高脂血癥是指人體內(nèi)脂質(zhì)代謝異常，是指血液中一種或多種物質(zhì)成分異常增高的病癥，它能直接導(dǎo)致動脈粥樣硬化等心腦血管疾病。高血脂癥又是誘發(fā)冠心病、動脈硬化、腦血管性癡呆、脂肪肝、糖尿癥、肥胖癥、性功能衰退等病癥的重要因素。因此，控制和調(diào)節(jié)血脂水平是預(yù)防和治療高血脂病及其并發(fā)癥的關(guān)鍵。中藥治療高血脂具有多途徑、多環(huán)節(jié)、多靶點作用,在提高生活質(zhì)量、逆轉(zhuǎn)靶器官損害、減少并發(fā)癥發(fā)生及治療難治性高血壓方面都具有獨特的優(yōu)勢。

目前國內(nèi)外專家對黑木耳的化學(xué)成分研究表明:黑木耳含有多糖類、腺苷、黑色素、麥角甾醇、萜類及多種維生素等化學(xué)成分。前期，相關(guān)研究報道主要集中在多糖類物質(zhì)的功能作用，近年也有有關(guān)黑木耳多酚類物質(zhì)的研究報道。它們能降低血清總膽固醇和甘油三酯的水平，預(yù)防動脈粥樣硬化斑塊形成，從而可明顯降低心血管疾病的發(fā)病率和死亡率。韓春然等報道黑木耳多糖能顯著降低高脂大鼠血清的tg、tc和ldl-c水平，并能顯著提高h(yuǎn)dl-c/tc。蔡小玲等對黑木耳多糖和紅菇多糖進行降膽固醇作用研究，結(jié)果表明黑木耳有顯著降低膽固醇作用。周國華等采用不同濃度黑木耳多糖對高脂模型小鼠進行試驗，試驗結(jié)果表明黑木耳多糖確具有顯著降血脂作用。郭素芬等通過研究證明黑木耳多糖還可抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖，從而抑制動脈粥樣硬化形成。刁小琴等研究了超聲輔助提取黑木耳多酚及其抑菌活性的研究，陳鋼等研究了黑木耳中多酚化合物微波提取工藝的研究。近年來，臨床已有較多的含黑木耳的復(fù)方用于治療高脂血癥，而單用黑木耳用于制備治療或輔助治療高脂血癥藥物也已有發(fā)明專利，如：(1)一種具有降血脂功效的黑木耳超微速溶沖劑(專利申請?zhí)?201510295259.8)；(2)一種黑木耳多糖片(專利申請?zhí)枺?01310564263.0)；(3)一種降脂、預(yù)防脂肪肝的功能食品(專利申請?zhí)枺?01310629794.3)。與以上專利相比，本專利的不同之處在于黑木耳提取物的成分不同，主要由三萜類化合物組成，是一種新型主要功能是調(diào)脂保健類藥物成分，本發(fā)明者除考察了其有效性外，發(fā)現(xiàn)此黑木耳提取物有較高安全性。故本發(fā)明具有經(jīng)濟、可開發(fā)的可行性。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明公開了一種具有降血脂作用的黑木耳三萜類化合物提取物及其在制備降血脂藥物及保健食品中的應(yīng)用。

該黑木耳三萜類化合物提取物對肝臟血清總膽固醇(tc)、低密度脂蛋白(ldl-c)有一定降低作用，而對甘油三酯(tg)、高密度脂蛋白(hdl-c)有調(diào)節(jié)、平衡的作用。

該黑木耳三萜類化合物提取物由以下方法制備得到:黑木耳經(jīng)機械粉碎，過篩，用8-15倍黑木耳重量的65％乙酸乙酯溶液進行熱回流提取，同時采用超聲波輔助加熱回流提取，超聲功率：200-800w，超聲溫度：25-55℃，超聲時間：15-30min，超聲處理1-3次，60-90℃熱回流提取1-3次，每次1-2h，合并提取液，抽濾，取上清液，減壓回收溶劑，即得黑木耳三萜類化合物提取物。

該黑木耳提取物含有以下有效成分:羽扇豆醇、羽扇豆酮、β-香樹酯醇和α-香樹酯酮等，三萜類化合物占總提取物的85-95％。

本發(fā)明所述黑木耳提取物可按常規(guī)工藝制成調(diào)脂保健食品及藥品，包括膠囊、片劑、顆粒劑、酒劑、口服液等常規(guī)劑型。

具體實施方式

下面詳細(xì)說明本發(fā)明，本發(fā)明的目的和效果將變得更加明顯。

本發(fā)明公布了作為黑木耳提取物作為降血脂藥物的制備方法和藥效試驗。制備方法采用了兩個實施例；藥效學(xué)實驗采用了高脂飼料致高脂血癥模型證明其藥效。

本發(fā)明的制備方法如下:

實施例一：

取黑木耳粗粉(過50目篩)，用8倍黑木耳重量的65％乙酸乙酯溶液進行熱回流提取，同時采用超聲波輔助加熱回流提取，超聲功率：400w，超聲溫度：35℃，超聲時間：15min，超聲處理1次，70℃熱回流提取2次(1h，lh)，合并2次提取液，抽濾，上清液減壓回收乙酸乙酯，得棕黃色狀液體，即為黑木耳三萜類化合物提取物。

實施例二：

取黑木耳粗粉(過60目篩)，用15倍黑木耳重量的65％乙酸乙酯溶液進行熱回流提取，同時采用超聲波輔助加熱回流提取，超聲功率：800w，超聲溫度：55℃，超聲時間：30min，超聲處理2次，80℃熱回流提取2次(2h，2h)，合并2次提取液，抽濾，上清液減壓回收乙酸乙酯，得棕黃色狀液體，即為黑木耳三萜類化合物提取物。

降血脂藥效試驗如下:

實施例三：

黑木耳提取物對高脂飼料致spf級雌性icr小鼠高脂血癥模型的血脂(tc、tg、ldl-c、hdl-c)具有顯著降低作用。

1實驗材料與儀器

1.1動物

spf級雌性icr小鼠，60只，體重20士2g，湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供，許可證號scxk(湘)2011-0003。

1.2試劑

高脂飼料由普通飼料、蛋黃粉、膽固醇、豬油、3號膽鹽配制，制作原料:蛋黃粉(批號20150902,杭州誠信醫(yī)療儀器有限公司)；3號膽鹽(批號20150722-10，杭州誠信醫(yī)療儀器有限公司)；膽固醇(批號20150324，杭州誠信醫(yī)療儀器有限公司)；豬油(批號20150917，杭州誠信醫(yī)療儀器有限公司)；普通飼料(江蘇南通特洛菲飼料科技有限公司)；總膽固醇(tc)、甘油三酷(tg)、高密度脂蛋白(hdl-c)、低密度脂蛋白(ldl-c)(均購于中生北控生物公司)。

1.3儀器

全自動生化分析儀(美國alcyon公司)；tgl-20m高速臺式冷凍離心機(上海安亭科學(xué)儀器廠)；lgj-18型真空冷凍干燥機(北京四環(huán)科學(xué)儀器廠)；al104電子天平(瑞士梅特勒公司)；

2實驗方法

2.1造模、分組及給藥

先將icr小鼠飼養(yǎng)一周，喂飼正常飼料，自由采水、采食。1周后按體重隨機分成6組，即正常對照組，模型對照組，陽性對照組，黑木耳提取物小、中、大劑量組。除正常對照組喂飼普通飼料外，其余各組均喂飼高脂飼料，各組動物自由采水、采食。試驗周期為12周。動物實驗開始后，黑木耳提取物及血脂康均按體重劑量進行灌胃，正常對照組和模型對照組采用蒸餾水進行灌胃。連續(xù)12周。

每三周采血一次，給藥后晚上開始禁食，禁食12-14h，不限飲水，次日眼眶取血，測定tc、tg、hdl-c、ldl-c含量；在實驗結(jié)束時，動物給藥后禁食12-14h，不限飲水，摘眼球采血，測定tc、tg、hdl-c、ldl-c含量。

2.2測定指標(biāo)

每三周采血一次，測量各組icr小鼠血清血脂水平：總膽固醇(tc)、甘油三酷(tg)、高密度脂蛋白膽固醇(hdl-c)、低密度脂蛋白膽固醇(ldl-c)的含量。

2.3統(tǒng)計分析

研究數(shù)據(jù)用spss17.0軟件分析，計量資料數(shù)據(jù)結(jié)果均采用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x士s)表示，組間差異采用單因素方差分析，以p<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3實驗結(jié)果

3.1黑木耳三萜類化合物提取物對喂飼高脂飼料icr小鼠tc的影響

由表1可知，在喂飼高脂飼料3周時，模型對照組的tc含量與正常對照組相比顯著增高(p<0.05)，與正常對照組相比模型對照組血清tc含量升高85％，說明喂養(yǎng)高脂飼料3周即可造成小鼠的高膽固醇模型。試驗同時發(fā)現(xiàn)，造模成功后繼續(xù)給予高脂飼料對模型組小鼠的血清tc無明顯升高，而是穩(wěn)定在一定的高水平。與模型組相比，黑木耳三萜類化合物提取物及血脂康各組對icr小鼠血清tc的濃度升高都有顯著抑制作用(p<0.05)，并且隨著試驗時間的延長，各給藥組血清中tc都呈繼續(xù)下降的趨勢，并呈量效關(guān)系。

表1黑木耳三萜類化合物提取物對喂飼高脂飼料icr小鼠tc的影響(n＝10)

注:同一列中上標(biāo)有不相同字母的數(shù)據(jù)之間有顯著性差異(p<0.05)。

3.2黑木耳三萜類化合物提取物對喂飼高脂飼料icr小鼠tg的影響

由表2可知,在喂飼高脂飼料3周時,模型對照組的tg含量與正常對照組相比顯著增高(p<0.05)。試驗同時發(fā)現(xiàn)，與模型組相比，黑木耳三萜類化合物提取物及血脂康各組對icr小鼠血清tg的濃度升高都有顯著抑制作用(p<0.05)，并且隨著試驗時間的延長，黑木耳三萜類化合物提取物高劑量組icr小鼠中血清中tg含量與正常對照組沒有顯著差異(p<0.05)，這說明了黑木耳三萜類化合物提取物具有強的調(diào)節(jié)血清中tg含量，也暗示黑木耳三萜類化合物提取物具有更強的保護生物體內(nèi)臟器官不受脂肪損害的功能作用。

表2黑木耳三萜類化合物提取物對喂飼高脂飼料icr小鼠tg的影響(n＝10)

注:同一列中上標(biāo)有不相同字母的數(shù)據(jù)之間有顯著性差異(p<0.05)。

3.3黑木耳三萜類化合物提取物對喂飼高脂飼料icr小鼠ldl-c的影響

由表3可知,在喂飼高脂飼料3周時,模型對照組的ldl-c含量與正常對照組相比顯著增高(p<0.05)。試驗同時發(fā)現(xiàn)，與模型組相比，黑木耳三萜類化合物提取物及血脂康各組對icr小鼠血清ldl-c的濃度升高都有顯著抑制作用(p<0.05)，并且隨著試驗時間的延長，各給藥組血清中l(wèi)dl-c都呈逐漸上升的趨勢，并呈量效關(guān)系。說明黑木耳三萜類化合物具有抑制ldl-c上升的功能作用。表3黑木耳三萜類化合物提取物對喂飼高脂飼料icr小鼠ldl-c的影響(n＝10)

注:同一列中上標(biāo)有不相同字母的數(shù)據(jù)之間有顯著性差異(p<0.05)。

由表4可知，所有喂飼高脂飼料的icr小鼠血清的hdl-c均顯著高于喂飼普通飼料的icr小鼠(p<0.05)，在經(jīng)過12周的試驗發(fā)現(xiàn)：黑木耳三萜類化合物提取物各組調(diào)節(jié)hdl-c水平的能力比較穩(wěn)定，且兩者間沒有顯著差異。這說明食用黑木耳是安全的，它不會降低生物體血液中正常hdl-c的含量，而是調(diào)節(jié)生物體血液中hdl-c的含量。

表4黑木耳三萜類化合物提取物對喂飼高脂飼料icr小鼠hdl-c的影響(n＝10)

注:同一列中上標(biāo)有不相同字母的數(shù)據(jù)之間有顯著性差異(p<0.05)。

本實施例顯示：黑木耳三萜類化合物提取物對血清tc、ldl-c有一定降低作用，對tg、hdl-c有調(diào)節(jié)、平衡的作用。說明黑木耳三萜類化合物具有調(diào)節(jié)血脂的作用。

綜上說明：黑木耳三萜類化合物提取物具有降低血脂的作用。在降低血脂方面有很大的開發(fā)空間，可開發(fā)為調(diào)脂保健食品及藥品等。

網(wǎng)址: 一種黑木耳提取物及其在降血脂藥物及保健食品中的應(yīng)用的制作方法 http://www.u1s5d6.cn/newsview626425.html