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直鏈淀粉含量及淀粉平均聚合度對(duì)抗性淀粉含量影響研究.doc

來(lái)源:泰然健康網(wǎng) 時(shí)間:2024年12月22日 05:16

直鏈淀粉含量及淀粉平均聚合度對(duì)抗性淀粉含量影響研究

直鏈淀粉含量及淀粉平均聚合度對(duì)抗性淀粉含量影響研究   摘要:直鏈淀粉含量與淀粉平均聚合度對(duì)抗性淀粉的形成有著重要的影響,以玉米淀粉、紅薯淀粉、豌豆淀粉、綠豆淀粉為原料,采用普魯蘭酶和α-淀粉酶協(xié)同制備抗性淀粉,改變淀粉的直鏈淀粉含量和聚合度,分析淀粉直鏈淀粉含量及其聚合度與抗性淀粉含量的關(guān)系。結(jié)果表明,直鏈淀粉含量與抗性淀粉含量呈明顯正相關(guān),平均聚合度在一定范圍內(nèi)有利于提高抗性淀粉的含量。   關(guān)鍵詞:直鏈淀粉含量;聚合度;抗性淀粉   中圖分類號(hào):TS236 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2017)02-0320-05   DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.02.028   抗性淀粉(Resistant Starch,RS)又稱抗酶解淀粉、難消化淀粉,在健康人體小腸內(nèi)不能被消化吸收[1]??剐缘矸劬哂信c膳食纖維類似作用,可延緩餐后血糖上升[2],將有效控制糖尿病病情,RS在體內(nèi)所產(chǎn)生的熱量不及普通淀粉的十分之一,所以可認(rèn)為RS在體內(nèi)為低能甚至不產(chǎn)生能量[3],RS在大腸內(nèi)的發(fā)酵產(chǎn)物主要是一些氣體和短鏈脂肪酸,對(duì)預(yù)防結(jié)腸癌有著重要的意義[4]??剐缘矸塾?種類型[5]:RS1(物理包埋淀粉)、RS2(天然具有抗消化的抗性淀粉)、RS3(回生淀粉)、RS4(化學(xué)改性淀粉)、RS5(直鏈淀粉-脂質(zhì)復(fù)合物)。其中,RS3是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。工業(yè)上主要用壓熱處理方法制備抗性淀粉,通常是將淀粉懸浮液先加熱到100 ℃以上,使淀粉充分糊化,讓直鏈淀粉分子從內(nèi)部釋放出來(lái),冷卻到一定溫度,維持足夠長(zhǎng)的時(shí)間,使直鏈淀粉回生,經(jīng)酶消化水解支鏈淀粉和無(wú)定型區(qū)淀粉分子,得到抗性淀粉。因此,直鏈淀粉含量的多少直接影響抗性淀粉含量,通過(guò)脫支處理可以使支鏈淀粉脫支,相應(yīng)增加直鏈淀粉含量,增加抗性淀粉含量[6,7]。Eerlingen等[8]研究了平均聚合度(DP)在40~610淀粉其抗性淀粉的含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)分子平均聚合度越小,抗性淀粉含量越低。聚合度也是淀粉分子形成抗性淀粉的重要參數(shù)。本試驗(yàn)以玉米淀粉、紅薯淀粉、豌豆淀粉、綠豆淀粉為原料,采用普魯蘭酶與α-淀粉酶協(xié)同制備抗性淀粉,研究直鏈淀粉含量和淀粉平均聚合度對(duì)抗性淀粉含量的影響。   1 材料與方法   1.1 材料與試劑   玉米淀粉,湖北任森農(nóng)業(yè)科技發(fā)展股份有限公司;紅薯淀粉,山東宏河圣齊生物工程有限公司;豌豆淀粉,成都達(dá)恒毛實(shí)業(yè)有限公司;綠豆淀粉,衡水富橋淀粉有限公司;馬鈴薯直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)樣品,上海源葉生物科技有限公司;玉米支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)樣品,上海源葉生物科技有限公司;普魯蘭酶,江蘇銳陽(yáng)生物科技有限公司;液體葡萄糖淀粉酶,安琪酵母股份有限公司;液體耐高溫α-淀粉酶,無(wú)錫賽德生物工程有限公司。   1.2 試驗(yàn)儀器與設(shè)備   AL204分析天平,上海右一儀器有限公司;掃描型紫外可見分光光度計(jì),Thermo Fisher Evolution 220;DF-101S恒溫加熱磁力攪拌器,鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司;LD-5低速離心機(jī),北京醫(yī)用離心機(jī)廠;立式壓力蒸汽滅菌鍋,上海博訊實(shí)業(yè)有限公司;數(shù)顯水浴恒溫振蕩器,常州博遠(yuǎn)實(shí)驗(yàn)分析儀器廠;雷磁PHS-3C PH計(jì),上海精密科學(xué)儀器有限公司。   1.3 試驗(yàn)方法   1.3.1 樣品直鏈淀粉含量測(cè)定方法 按照GB 15683-2008的方法進(jìn)行測(cè)定和計(jì)算。   1.3.2 淀粉平均聚合度的測(cè)定 聚合度的測(cè)定為還原末端法[6,9]。樣品經(jīng)過(guò)85%的乙醇數(shù)次洗滌以除去可溶性糖,烘至恒重。稱取0.200 g不同制備方法的淀粉樣品,在2.00 mol/L的KOH溶液中溶解4 h直到全部溶解,加入少量蒸餾水,用1.00 mol/L的HCl中和至pH 6.0~7.0,后用蒸餾水定容至50 mL。取0.5 mL已配置好的溶液,DNS測(cè)定還原性末端的量(以葡萄糖的量表示)。按以下公式計(jì)算淀粉分子平均聚合度:   DP=■   式中,W為淀粉樣品的質(zhì)量(mg);1.1為淀粉換算成葡萄糖的系數(shù),Gr為用DNS法則1 mL樣品溶液的還原末端數(shù)量。   1.3.3 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 采用3,5-二硝基水楊酸比色法[10]制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。   1.3.4 抗性淀粉含量的測(cè)定 根據(jù)Goni法[11,12]測(cè)定抗性淀粉。稱取1 g淀粉試樣溶于20 mL、pH 6.5的磷酸緩沖液中。加入1 mL耐熱α-淀粉酶溶液(20 U/mL),置于95 ℃水浴中振蕩30 min,通過(guò)耐熱α-淀粉酶溶液分解其中的可消化淀粉。用檸檬酸(1 mol/L)調(diào)節(jié)pH至4.0~4.5,再加入1 mL糖化酶(1 000 U/mL)。將樣品進(jìn)行水浴振蕩,溫度為60 ℃,時(shí)間為60 min,至可消化淀粉全部轉(zhuǎn)化為葡萄糖。將得

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